论文部分内容阅读
目的制备魟鱼软骨多糖眼用原位凝胶并进行质量评价,同时对其进行药效学和药代动力学的研究,为预防及治疗眼外伤导致的角膜血管新生、提高生物利用度以及魟鱼软骨多糖相关新产品的研发奠定理论基础。方法以卡波姆、羟丙基甲基纤维素(K4M)、泊洛沙姆等为代表的聚合物材料为主要基质,以胶凝能力和黏度、相变温度为考察指标,筛选眼用原位凝胶的基质用量与配比。制备魟鱼软骨多糖眼用原位凝胶剂,并对其性状、pH值、制剂的含量、离体角膜渗透性、稳定性、刺激性和无菌检查等进行全面考察。选取32只大鼠作为药效学实验研究对象,将大鼠平均分为4组,每组8只。分别记为低剂量组、中剂量组、高剂量组和对照组。采用缝线诱导法建立大鼠角膜的新生血管模型。3组研究组大鼠分别给与25 mg/m L、50 mg/m L、100 mg/m L的自制魟鱼软骨多糖眼用原位凝胶剂点眼,用量为100μL/次,疗程为12 d,对照组大鼠给予生理盐水点眼,用量为100μL/次,疗程为12 d。于第3、6、9、12 d,在LYL-II型裂隙灯显微镜下测量每只大鼠的新生血管长度及宽度,并且观察4组大鼠的病理学组织。10只健康家兔作为药代动力学实验研究对象,按照收集玻璃体的时间不同分为5组,各2只,记为A(10 min)、B(30 min)、C(60 min)、D(120 min)、E(180 min)组。给予5组家兔魟鱼软骨多糖眼用原位凝胶,用量为200μL,之后将5组家兔在不同时间点收集玻璃体,测定不同时间点家兔给药后角膜、虹膜、玻璃体及房水中的药物浓度。结果原位凝胶的类型确定为pH敏感型,最佳的配比为卡波姆940 0.1 g与HPMC0.4 g(水100 m L)。制得的魟鱼软骨多糖眼用原位凝胶为淡黄色、澄清的透明状液体,pH值在5.5左右,符合人眼的pH值耐受范围,制剂稳定性良好,对眼局部无刺激性,无菌检查符合要求。药效学实验结果:点眼3d后,低剂量组的大鼠角膜新生血管面积(12.36±3.39)mm2与对照组大鼠的新生血管面积(12.46±4.36)mm2相差不大。中剂量组和高剂量组的大鼠新生血管面积明显低于低剂量组和生理盐水组,分别是(2.39±3.68)mm2和(2.01±2.96)mm2。12d后,中剂量组和高剂量组的新生血管面积分别为(5.36±7.12)mm2和(4.89±6.59)mm2,虽然较各自第3 d测量值要大,但是明显低于对照组(P<0.05)。病理组织学结果同样表明,浓度50mg/m L以上的魟鱼软骨多糖眼用原位凝胶剂可以使大鼠眼角膜新生血管得到较大范围的控制,并可有效抑制角膜组织炎性细胞浸润。药代动力学实验结果:兔眼内的虹膜中药物浓度先上升后下降,60 min达到最大,为(28.2±0.4)μg/m L;角膜中药物浓度呈下降的趋势,10 min后达到最大,为(17.0±0.3)μg/m L;房水中药物浓度呈先上升后下降的趋势,60 min后达到最大,为(9.3±0.2)μg/m L;玻璃体中药物浓度基本保持稳定。给药180 min后,角膜中药物浓度最大达到(3.1±0.5)μg/m L。结论pH敏感型魟鱼软骨多糖眼用原位凝胶稳定性良好,安全有效,且在角膜中停留时间最长,这样对于治疗角膜新生血管疾病具有积极的作用。