成像过氧亚硝酸盐的新型化学发光纳米探针的构建与应用

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化学发光成像由于其无需外部激发光源和没有自发荧光干扰等优点被广泛应用于体外免疫测定,体内炎症和肿瘤微环境成像等。但是传统的化学发光体系选择性较差,且发射出的光大多位于可见光区。而生物组织的散射作用导致了化学发光成像低穿透深度等问题,无法凸显化学发光成像高信噪比,高对比度的成像优势。基于这些问题,本论文首次发现对过氧亚硝酸盐响应的新型化学发光分子(氧杂并五苯),并在此基础上构建了具有不同功能的复合纳米探针,将其应用至内源性过氧亚硝酸盐的检测和成像。通过化学发光能量转移克服了化学发光成像发光波长短,穿透深度浅的问题,实现了较高选择性,超高灵敏度的化学发光成像。本论文研究内容分为三个部分:(1)发现氧杂并五苯染料可以与过氧亚硝酸盐反应产生化学发光,并初步研究了其化学发光机制。在此基础上,构建了胶束结构的新型化学发光纳米探针。该探针可通过化学发光检测过氧亚硝酸盐,并具有水溶性好、选择性高、灵敏度高的优点。(2)针对该探针存在的发光波长短和发光强度较弱的不足,我们基于化学发光共振能量转移原理,构建了近红外化学发光复合纳米探针。通过在胶束结构纳米探针中掺杂化学发光受体分子,显著延长了化学发光波长并有效提高了化学发光强度。该复合探针实现了对过氧亚硝酸盐高灵敏度与高选择性的近红外化学发光成像,增强了化学发光的组织穿透力,为后续在活体成像中的应用提供了重要支撑。(3)基于所开发的近红外化学发光复合纳米探针,开展活体中内源性过氧亚硝酸盐检测与成像的研究。我们将复合纳米探针分别通过原位注射和系统注射两种方式,应用于检测急性炎症,腹膜炎,肿瘤和药物诱导肝损伤等模型中内源性过氧亚硝酸盐含量,发现该化学发光探针可高灵敏度、高选择性监测多种疾病中内源性过氧亚硝酸水平的实时变化。这为阐明各种过氧亚硝酸盐相关疾病的病理过程提供了新的成像分析工具。
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