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目的通过何首乌不同炮制品成分含量差异、抗衰老药效学实验及不同炮制品肝毒性研究，探索何首乌“九蒸九晒”炮制法下不同蒸晒炮制品的主要化学成分和毒效差异。
方法1.通过HPLC技术，检测何首乌不同炮制品中大黄素、大黄素甲醚、没食子酸及二苯乙烯苷成分的含量。
2．SD大鼠随机分成空白组、生首乌组、药典制首乌组、一蒸一晒何首乌组、二蒸二晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、四蒸四晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组、六蒸六晒何首乌组、七蒸七晒何首乌组、八蒸八晒何首乌组、九蒸九晒何首乌组共12组，每组3只。连续灌胃给药连续7天后，取血分离血清，灭活过滤制备含药血清。检测含药血清对HepG2肝细胞的毒性作用以及细胞凋亡率。
3.SD大鼠随机分成空白组、阳性药(雷公藤多苷片)组、生首乌组、药典制首乌组、一蒸一晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组、七蒸七晒何首乌组、九蒸九晒何首乌组共9组，每组8只。除空白组每日给予等量的生理盐水外，每组连续灌胃相应药物12周，取血分离血清，取肝脏，分别进行血清生化指标AST、ALT、ALP、TBIL、DBIL的检测以及肝脏病理切片观察。
4.SD大鼠随机分成空白组、模型组、阳性药(维生素E)组、生首乌组、药典制首乌组、一蒸一晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组、七蒸七晒何首乌组、九蒸九晒何首乌组共10组，每组8只。除空白组外，每组每日经颈背部皮下注射D-半乳糖造模，同时空白组和模型组每日灌胃生理盐水，其他实验组灌胃相应药物，造模和给药同时进行，共4周。4周后，取脑组织，进行脑组织中SOD、MDA、MAO、GSH-PX含量检测。
结果1.何首乌经过九蒸和九晒的炮制法后，没食子酸的含量从生品到九蒸九晒提升明显，二苯乙烯苷含量下降明显,游离蒽醌大黄素、大黄素甲醚含量明显上升。
2.何首乌各实验组从生首乌组到九蒸九晒制品组，随着蒸晒次数的增加，各组含药血清对HepG2细胞抑制程度逐渐减弱，其中六蒸六晒组含药血清对HepG2细胞增殖具有促进作用，与药典法制首乌作用相似，都具有增殖效果。与空白组吸光度值相比，含药血清浓度为15%的生首乌组、一蒸一晒何首乌组、二蒸二晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、四蒸四晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组及七蒸七晒何首乌组具有显著性差异(P＜0.05)。各实验组都有不同程度的细胞早期、晚期凋亡和坏死情况发生，从生首乌组到九蒸九晒何首乌组，随着蒸晒次数的增加，各组含药血清对HepG2细胞凋亡的影响逐渐减弱，且与空白大鼠血清组比较具有显著性差异(P＜0.01)；空白血清组与胎牛血清组对HepG2细胞凋亡影响结果相似，无统计学差异(P＞0.05)。
3.生首乌组及何首乌一、三、五、七、九蒸晒组的ALT、AST、TBIL、DBIL含量随着蒸晒次数的增加而总体呈降低趋势，ALP含量随着蒸晒次数的增加而逐渐增高。与空白组比较，生首乌组和五蒸五晒何首乌组大鼠血清ALT含量具有明显差异(P＜0.05),生首乌组及所有何首乌蒸晒组的AST含量均具有显著性差异(P＜0.01)，阳性药组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的TBIL含量具有统计学差异(P＜0.05)，所有试验组的DBIL含量具有统计学差异(P＜0.05)，生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的ALP含量具有统计学差异(P＜0.05)；与生首乌组比较，一蒸一晒组ALT含量差异明显(P＜0.05)，阳性药组、药典法制首乌组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的AST含量差异显著(P＜0.01)，阳性药组、七蒸七晒组、九蒸九晒组的TBIL含量具有明显差异(P＜0.05)，九蒸九晒组DBIL含量具有显著差异(P＜0.05)，九蒸九晒组的ALP含量具有明显差异(P＜0.05)。
4.从生首乌组到何首乌一、三、五、七、九蒸晒组中大鼠脑组织SOD、GSH-Px酶含量随着炮制次数的增加而增高，MDA、MAO酶含量随着炮制次数的增加而减少。与空白组比较，模型组、药典法制首乌组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、九蒸九晒组的GSH-Px含量具有明显的差异(P＜0.05)，模型组、药典法制首乌组、生首乌组、及何首乌一、三、五、七、九蒸晒组MAO含量也具有显著的差异(P＜0.01)，模型组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的SOD酶含量具有统计学差异(P＜0.05)，模型组、药典法制首乌组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组的MDA酶含量具有显著差异(P＜0.05)；与生首乌比较，阳性药组、药典法制首乌组的SOD酶含量具有统计学差异(P＜0.05)，模型组的MDA酶含量具有显著差异(P＜0.01)，阳性药组、药典法制首乌组、七蒸七晒组、九蒸九晒组的GSH-Px含量具有统计学差异(P＜0.05)，阳性药组、药典法制首乌组以及三、五、七、九蒸晒组何首乌的MAO含量也具有显著的差异(P＜0.01)。
结论1.“九蒸九晒”炮制法炮制何首乌过程中会使得二苯乙烯苷成分含量逐渐下降，而游离蒽醌大黄素和大黄素甲醚以及鞣质没食子酸会呈现上升趋势。
2.“九蒸九晒”炮制法可降低何首乌致肝损伤的程度，其中九蒸九晒何首乌的减毒效果最佳。
3.“九蒸九晒”炮制法可促进何首乌抗氧化的作用，其中七蒸七晒何首乌的抗氧化效果最佳。
方法1.通过HPLC技术，检测何首乌不同炮制品中大黄素、大黄素甲醚、没食子酸及二苯乙烯苷成分的含量。
2．SD大鼠随机分成空白组、生首乌组、药典制首乌组、一蒸一晒何首乌组、二蒸二晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、四蒸四晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组、六蒸六晒何首乌组、七蒸七晒何首乌组、八蒸八晒何首乌组、九蒸九晒何首乌组共12组，每组3只。连续灌胃给药连续7天后，取血分离血清，灭活过滤制备含药血清。检测含药血清对HepG2肝细胞的毒性作用以及细胞凋亡率。
3.SD大鼠随机分成空白组、阳性药(雷公藤多苷片)组、生首乌组、药典制首乌组、一蒸一晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组、七蒸七晒何首乌组、九蒸九晒何首乌组共9组，每组8只。除空白组每日给予等量的生理盐水外，每组连续灌胃相应药物12周，取血分离血清，取肝脏，分别进行血清生化指标AST、ALT、ALP、TBIL、DBIL的检测以及肝脏病理切片观察。
4.SD大鼠随机分成空白组、模型组、阳性药(维生素E)组、生首乌组、药典制首乌组、一蒸一晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组、七蒸七晒何首乌组、九蒸九晒何首乌组共10组，每组8只。除空白组外，每组每日经颈背部皮下注射D-半乳糖造模，同时空白组和模型组每日灌胃生理盐水，其他实验组灌胃相应药物，造模和给药同时进行，共4周。4周后，取脑组织，进行脑组织中SOD、MDA、MAO、GSH-PX含量检测。
结果1.何首乌经过九蒸和九晒的炮制法后，没食子酸的含量从生品到九蒸九晒提升明显，二苯乙烯苷含量下降明显,游离蒽醌大黄素、大黄素甲醚含量明显上升。
2.何首乌各实验组从生首乌组到九蒸九晒制品组，随着蒸晒次数的增加，各组含药血清对HepG2细胞抑制程度逐渐减弱，其中六蒸六晒组含药血清对HepG2细胞增殖具有促进作用，与药典法制首乌作用相似，都具有增殖效果。与空白组吸光度值相比，含药血清浓度为15%的生首乌组、一蒸一晒何首乌组、二蒸二晒何首乌组、三蒸三晒何首乌组、四蒸四晒何首乌组、五蒸五晒何首乌组及七蒸七晒何首乌组具有显著性差异(P＜0.05)。各实验组都有不同程度的细胞早期、晚期凋亡和坏死情况发生，从生首乌组到九蒸九晒何首乌组，随着蒸晒次数的增加，各组含药血清对HepG2细胞凋亡的影响逐渐减弱，且与空白大鼠血清组比较具有显著性差异(P＜0.01)；空白血清组与胎牛血清组对HepG2细胞凋亡影响结果相似，无统计学差异(P＞0.05)。
3.生首乌组及何首乌一、三、五、七、九蒸晒组的ALT、AST、TBIL、DBIL含量随着蒸晒次数的增加而总体呈降低趋势，ALP含量随着蒸晒次数的增加而逐渐增高。与空白组比较，生首乌组和五蒸五晒何首乌组大鼠血清ALT含量具有明显差异(P＜0.05),生首乌组及所有何首乌蒸晒组的AST含量均具有显著性差异(P＜0.01)，阳性药组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的TBIL含量具有统计学差异(P＜0.05)，所有试验组的DBIL含量具有统计学差异(P＜0.05)，生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的ALP含量具有统计学差异(P＜0.05)；与生首乌组比较，一蒸一晒组ALT含量差异明显(P＜0.05)，阳性药组、药典法制首乌组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的AST含量差异显著(P＜0.01)，阳性药组、七蒸七晒组、九蒸九晒组的TBIL含量具有明显差异(P＜0.05)，九蒸九晒组DBIL含量具有显著差异(P＜0.05)，九蒸九晒组的ALP含量具有明显差异(P＜0.05)。
4.从生首乌组到何首乌一、三、五、七、九蒸晒组中大鼠脑组织SOD、GSH-Px酶含量随着炮制次数的增加而增高，MDA、MAO酶含量随着炮制次数的增加而减少。与空白组比较，模型组、药典法制首乌组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、九蒸九晒组的GSH-Px含量具有明显的差异(P＜0.05)，模型组、药典法制首乌组、生首乌组、及何首乌一、三、五、七、九蒸晒组MAO含量也具有显著的差异(P＜0.01)，模型组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组、七蒸七晒组的SOD酶含量具有统计学差异(P＜0.05)，模型组、药典法制首乌组、生首乌组、一蒸一晒组、三蒸三晒组、五蒸五晒组的MDA酶含量具有显著差异(P＜0.05)；与生首乌比较，阳性药组、药典法制首乌组的SOD酶含量具有统计学差异(P＜0.05)，模型组的MDA酶含量具有显著差异(P＜0.01)，阳性药组、药典法制首乌组、七蒸七晒组、九蒸九晒组的GSH-Px含量具有统计学差异(P＜0.05)，阳性药组、药典法制首乌组以及三、五、七、九蒸晒组何首乌的MAO含量也具有显著的差异(P＜0.01)。
结论1.“九蒸九晒”炮制法炮制何首乌过程中会使得二苯乙烯苷成分含量逐渐下降，而游离蒽醌大黄素和大黄素甲醚以及鞣质没食子酸会呈现上升趋势。
2.“九蒸九晒”炮制法可降低何首乌致肝损伤的程度，其中九蒸九晒何首乌的减毒效果最佳。
3.“九蒸九晒”炮制法可促进何首乌抗氧化的作用，其中七蒸七晒何首乌的抗氧化效果最佳。