蒺藜果甾体皂苷成分鉴定及其对脑缺血损伤保护作用研究

来源 :吉林大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangguopingzhang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
中药蒺藜又名刺蒺藜、硬蒺藜、白蒺藜,2005年版《中华人民共和国药典》收载蒺藜为蒺藜科植物蒺藜(Tribulus terrestris L.)的干燥成熟果实,具散风,明目,下气,行血,补肾益精之功用。蒺藜茎叶的药理研究及化学成分研究文献报道较多,但对蒺藜果的抗脑梗塞、脑缺血有效成分及作用机理研究较少,本实验对蒺藜果甾体皂苷抗脑缺血药理作用机理及甾体皂苷组成成分结构鉴定进行了研究,具体内容如下:采用线栓法建立大脑中动脉局灶性脑缺血模型,观察了蒺藜果皂苷(GZG)对脑缺血大鼠的神经症状、脑梗死面积以及血清GSH-PX和SOD,MDA、NO、FFA等生化指标的影响,结果表明:GZG可明显改善局灶性脑缺血大鼠神经损害症状,减少脑梗死面积,提高血清中GSH-PX和SOD活性,降低MDA、NO、FFA含量。采用流式细胞术检测GZG对局灶性脑缺血致脑细胞凋亡百分率、线粒体膜电位变化及对脑细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。Real time PCR方法检测GZG对脑细胞Bel-2和Bax mRNA水平的影响。结果表明GZG可降低细胞凋亡的百分率,稳定线粒体膜电位,上调Bel-2蛋白表达及下调Bax蛋白表达等。能够促进Bcl-2 mRNA水平,抑制Bax mRNA水平的增加,说明GZG通过阻止线粒体膜电位的降低,降低线粒体膜的通透性,起到保护线粒体的作用,调节细胞凋亡相关的Bcl-2和Bax的表达和Bcl-2和Bax mRNA水平而抑制脑细胞的凋亡,保护脑细胞的作用。采用大鼠脑缺血再灌注损伤的模型,常规石蜡包埋、切片、HE染色,光镜检查,观察GZG对缺血脑组织形态学变化,测定血中ET、TNF-α、MDA、NO、SOD含量。结果表明,GZG明显减少缺血再灌注损伤大鼠血中ET、TNF-α、MDA、NO含量,提高SOD活性。形态学观察GZG对脑缺血再灌注造成的损伤具有明显的保护作用。利用传统植化分离手段和现代分离技术,包括大孔树脂、硅胶、凝胶、反相硅胶等常压柱色谱,制备HPLC高效液相色谱法等技术,从GZG中分离得到了14种蒺藜果甾体皂苷,利用波谱方法包括1H NMR,13C NMR,ESIMS等技术鉴定了它们的结构,其中应用2D-NMR包括HMBC、HMQC、1H-1H COSY、TOCSY等方法鉴定了5个新的甾体皂苷的结构,它们是:26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-5α-呋甾-3β,22α,26-三醇-3-O-[β-D-吡喃木糖基(1→3)]-[β-D-吡喃木糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖苷(1);26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-5α-呋甾烷-20(22)-烯-2α,3β,26-三醇-3-O-β-D-吡喃半乳糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖苷(2);25R-5α-呋甾-△20(22)-烯-12-酮-3β,26-二醇-26-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3);26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋甾-20(22)-烯-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)]-β-D-吡喃半乳糖苷(4);26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-5α-呋甾-12酮-2α,3β,22α,26-四醇-3-O-α-L-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷(5)。
其他文献
警察作为人民民主专政的工具,担负着维护我国国家安全,维护社会治安秩序,保卫公民的人身安全、人身自由和合法财产,保护公共财产,预防、制止和惩治违法犯罪的任务。在保护人民和打
私募投资基金在我国经历了初期的小众融资工具到“阳光化”的路径,异军突起成为资本市场中一股倍受关注的力量,投资者也呈现爆发式的增长。然而违规私募却屡见不鲜,向不适合
分析病毒性肝炎伴发脂肪肝的研究现状,探讨中医药研究及治疗思路.在分析基础上提出"肝脾同调、湿痰瘀同治为基本治则;标本兼治、补泻结合为基本思路;中西合治、联合用药为治疗
贵州是中央红军长征转战时间最长、地域最广、影响最大的省份之一。80年来从中央到地方形成了数量可观的研究资料。文章对中央红军转战贵州时期的研究资料从港台及国外研究情
本文使用稻瘟霉活性筛选模型(Pyricularia oryzae bioassay)对薯蓣科薯蓣属植物—圆果三角叶薯蓣(Dioscorea deltoidea Wall var. orbiculata)和百合科开口箭属植物—弯蕊开
随着企业外部环境日益动态化 ,传统的企业环境分析模式即由环境到战略的单向线性思维模式 ,将被环境与企业战略的互动模式所代替。因而在企业战略与环境的分析中 ,一方面要分
孔子<诗>论中的"兴观群怨"本为学<诗>用<诗>之法.但在有<诗>风气渐衰、通经致用的文化背景逐渐淡去之后,"兴"在某些情况下流转成为作诗之法.到王夫之以"兴观群怨"提举其诗学