论文部分内容阅读
目的:通过代谢组学技术检测胆结石患者血清胆汁酸代谢谱,经比对分析得出不同疾病状态、不同证型胆结石患者的胆汁酸代谢谱特征,并进行生物信息学分析,获得代谢标志物可能涉及的分子生物学网络通路,发掘可能预测胆结石发病的代谢物,为胆结石证候分类提供数据支持。方法:纳入胆结石患者30例归为GS组,按性别年龄配对健康人30例,归为H组,作为GS组的对照。纳入新发病胆结石患者未发病节点样本19例归为GS-0组,发病节点样本19例归为GS-1组,按性别年龄配对健康人19例归为H-O组,作为GS-0组的对照组;横向比较GS组与H组、GS-0组与H0组两组之间的胆汁酸代谢谱差异,对以上胆酸代谢谱差异结果进行生物信息学分析。纵向比较GS-1组与GS-0组胆汁酸代谢谱差异,对差异结果进行生物信息学分析。比较肝阴不足型胆结石患者和肝胆气郁型胆结石患者胆汁酸代谢谱差异,进行生物信息学分析。结果:1.GS组与健康人群相比,胆结石患者存在如下胆汁酸谱差异物10种。下调的差异性代谢物为熊脱氧胆酸(UDCA),上调趋势的差异性代谢物为甘氨胆酸(GCA)、猪脱氧胆酸(HDCA)、牛磺胆酸(TCA)、甘氨鹅脱氧胆酸(GDCA)、甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)、猪胆酸(HCA)、牛磺鹅脱氧胆酸(TCDCA)、7-酮基脱氧胆酸(7-KetoDCA)。GS-0与健康人群存在胆汁酸谱存在12种差异物,上调趋势的差异性代谢物为甘氨胆酸(GCA)、猪脱氧胆酸(HDCA)、牛磺胆酸(TCA)、甘氨鹅胆酸(GDCA)、甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA)、猪胆酸(HCA)、牛磺鹅脱氧胆酸(TCDCA)、7-酮基脱氧胆酸(7-KetoDCA)、胆酸(CA)、鹅脱氧胆酸(CDCA)、脱氧胆酸(DCA)、石胆酸(LCA)。无论是胆结石患者还是胆结石疾病前状态人群,其血清胆汁酸代谢谱都与健康人群存在差别,两者共同的差异胆汁酸为GCA、HDCA、TCA、GDCA、GCDCA、HCA、TCDCA、7-KetoDCA,且波动趋向一致。GS-0与GS-1比较,存在9种差异性代谢物:上调趋势的差异性代谢物为猪脱氧胆酸(HDCA)、7-酮基脱氧胆酸(7-KetoDCA)、猪胆酸(HCA)。下调趋势的差异性代谢物为鹅脱氧胆酸(CDCA)、石胆酸(LCA)、胆酸(CA)、甘氨猪脱氧胆酸(GHDCA)、脱氧胆酸(DCA)、甘氨脱氧胆酸(GDCA)。通过横向对比可知,GCA、HDCA具有较大的VIP贡献值。纵向对比发现,HDCA是新发病胆结石患者未发病状态与疾病前状态的VIP贡献值较大的代谢差异物,从未发病状态到疾病状态,HDCA呈升高趋势。2.胆结石发病过程涉及生物学作用包括胆汁酸生物合成,中性途径,FXR/RXR通路激活、肝内胆汁淤积,生物分子网络涵盖:GATA3、GATA4、GATA6、GRB2、HNF4-α、KLF4、MYC、PAX1、POU5F1、SOX2、SOX7、TAF4、CEBPA、Sprr2,生物学改变包括胆汁酸合成障碍、体重异常、环磷腺苷合成异常、动脉粥样硬化。胆结石疾病前状态至疾病状态涉及上游调控因子,乳糖和降脂素。涉及生物学改变类型包括自身体重的变化、动脉粥样硬化、胆固醇代谢。3.胆结石肝阴不足证和肝胆气郁证相比较,肝胆气郁组CA、LCA水平上调,GHCA水平下调。胆汁酸谱差异物涉及生物学作用包括:FXR/RXR通路的激活、PXR/RXR通路的激活、胆汁酸生物合成,中性途径、肝内胆汁淤积,生物分子网络涵盖:GATA3、GATA4、GATA6、GRB2、HNF4-α、KLF4、MYC、PAX1、POU5F1、SOX2、SOX7、TAF4、CEBPA、Sprr2,及生物学改变包括:肝内胆汁淤积、胆汁酸合成障碍、环腺苷酸合成、结肠癌细胞激活、肌成纤维细胞激活、DNA损伤。肝胆气郁证与胆汁淤积相关性更大。结论:HDCA可能是贯穿胆结石发病过程中,能够预测胆结石发病机制的胆汁酸。胆结石肝阴不足证和肝胆气郁证相比较,肝胆气郁组CA、LCA水平上调,GHCA水平下调。代谢组学技术联合生物信息学技术是中西医结合探索疾病实质的有效研究方法。为早期预测胆结石发病提供依据。