【摘 要】
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目的通过胰岛素和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)对磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的激活和抑制作用,观察PI3K/Akt信号通路
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目的通过胰岛素和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)抑制剂渥曼青霉素(wortmannin)对磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的激活和抑制作用,观察PI3K/Akt信号通路对海马神经元β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)表达的影响。方法40只SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、胰岛素组和渥曼青霉素组,海马立体定向注射胰岛素和PI3K抑制剂渥曼青霉素。用免疫组织化学和Western blot法检测PI3K/Akt信号传导相关蛋白pAkt、Akt、pGSK-3α以及BACE1、BACE1裂解APP产物β-CTF的表达水平。结果⑴注射胰岛素的海马PI3K信号通路下游信号分子较对照组:Akt表达增加(t=4.9150,P=0.0001),Akt ser473位点磷酸化(pAkt)水平上调(t=4.5598,P=0.0002),糖原合成激酶-3α(GSK-3α)磷酸化水平降低(t=3.5871,P=0.0018),而成熟的BACE1及其裂解产物β分泌酶C末端(β-CTF)表达下调(分别t=2.3464,P=0.0275;t=2.1943,P=0.0402)。⑵渥曼青霉素组的PI3K下游信号分子Akt、pAkt表达明显被抑制(t=7.1244,P=0.0000;t=3.8933,P=0.0009),磷酸化GSK-3α表达增加(t=4.0267,P=0.0007),同时成熟的BACE1和β-CTF的表达较对照组上调(分别t=11.5980,P=0.0000;t=4.2105,P=0.0004)。结论胰岛素信号通路PI3K/Akt可以调节BACE1的表达和活性并参与阿尔茨海默病的发病机制。
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