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目的:本研究通过将重组人程序性细胞死亡分子5(rhPDCD5)蛋白与顺铂联合作用于肺腺癌A549细胞,观察rh PDCD5蛋白对顺铂化疗的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:1.计数法绘制A549细胞生长曲线;2.采用激光扫描共聚焦荧光显微镜检测不同浓度的rh PDCD5蛋白作用于A549细胞后对PDCD5蛋白表达的影响;3.采用Elisa法测不同浓度顺铂作用于A549细胞后对PDCD5蛋白的表达影响;4.采用MTT法分别检测不同浓度的rh PDCD5蛋白、不同浓度的顺铂对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制率的影响,并检测对照组、rh PDCD5(15 mg/L)、顺铂组(20 mg/L)、rh PDCD5 15 mg/L+顺铂20 mg/L组、rh PDCD5 30 mg/L+顺铂20 mg/L组对A549细胞的生长抑制作用;5.采用流式细胞仪检测各组对细胞凋亡、细胞周期的影响;6.采用Caspase-3活性荧光检测试剂盒检测各组细胞Caspase-3活性的表达。结果:1.细胞计数法计算A549细胞倍增时间为18h;2.激光扫描共聚焦免疫荧光显微镜结果显示随着rh PDCD5蛋白浓度的升高,A549细胞内PDCD5蛋白表达增强;3.ELISA结果显示随着顺铂浓度的升高,A549细胞分泌PDCD5蛋白增加(F=354.125,P<0.001);4.MTT结果显示,与对照组相比,不同浓度rh PDCD5蛋白对细胞增殖抑制率的作用不明显(F=0.114,P=0.949);随着顺铂浓度的增高,抑制作用逐步增强,药物剂量与细胞增殖抑制率呈正相关(F=88.564,P<0.01);对照组、rh PDCD5、顺铂组、rh PDCD5 15 mg/L+顺铂20 mg/L组、rh PDCD5 30 mg/L+顺铂20 mg/L组的抑制率分别为(0.00±0.00)%、(0.6±1.07)%、(49.67±1.43)%、(68.17±1.49)%、(78.03±0.94)%,,联合用药组对细胞有更强的抑制作用(F=1095.472,P<0.001);5.流式细胞仪检测细胞周期结果显示,以上各组各组间G0/G1期所占比列分别为(26.43±0.95)%、(27.34±0.34)%、(47.88±0.39)%、(59.75±0.38)%、(73.78±2.11)%,组间比差异有统计学意义(F=365.501,P<0.001)6.流式细胞仪检测细胞凋亡结果显示,以上各组凋亡率分别为(6.563±0.49)%、(5.07±0.49)%、(22.31±0.64)%、(43.30±0.62)%、(64.25±0.54)%,组间比差异有统计学意义(F=2054.594,P<0.001);7.蛋白活性荧光检测结果显示各组间Caspase-3的活化程度分别为22.28±0.06、2.26±0.13、3.93±0.25、9.76±0.11、11.62±0.24,各组间差异有统计学意义(F=877.907,P<0.001)。结论:1.RhPDCD5蛋白可以进入细胞发挥作用,顺铂可以促进A549细胞内PDCD5蛋白的表达;2.单独应用对A549细胞无杀伤作用;3.Rh PDCD5蛋白联合顺铂将细胞周期阻滞于G0/G1期,抑制肺腺癌,细胞增殖;4.Rh PDCD5蛋白联合顺铂使肺腺癌A549细胞Caspase-3活化增强,促进细胞凋亡。