活性氧对诱导多功能干细胞(iPS)的作用及功能研究

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诱导多功能干细胞(iPSCs)是一种新型干细胞,系经转入4个特定的转录因子到小鼠或人的体细胞,诱导其重编程为未分化的多能细胞。本课题所用的诱导多功能干细胞是由小鼠胚胎成纤维细胞经转入Oct3/4, Sox2, Klf4和c-Myc等4个转录因子诱导而来。诱导多功能干细胞是干细胞治疗中很有前景的一种治疗方法,细胞靶向性则是细胞治疗的关键。活性氧族通过氧化还原反应,在血管生物学中发挥着重要作用。已有研究证实,过量的活性氧对干细胞的生物学功能是有害的,但适量的活性氧对干细胞功能的维持则是必需的。然而,活性氧对iPS细胞生物学功能的影响及其对iPS细胞的靶向性研究尚未见报道。本课题中,我们通过给予外源性的H2O2和抗氧化剂NAC,研究活性氧对小鼠iPS细胞生物学功能的影响。给予H2O2和NAC处理24小时后,收集纯化后的iPS细胞,对其生物学功能作进一步研究,如细胞增殖、凋亡、周期、迁移、粘附、衰老和自噬等。结果显示,外源性的H2O2和抗氧化剂NAC均可阻碍iPS细胞的粘附能力,同时还可以诱导iPS细胞的凋亡与衰老。另外,NAC还可以抑制iPS细胞的迁移能力,同样可以抑制iPS细胞跨内皮细胞的迁移能力。给予短期的H2O2处理后,部分抗氧化基因表达量上调可能是iPS细胞对抗氧化应激的一种保护机制。在小鼠单下肢缺血再灌注损伤模型中,尾静脉注射iPS细胞可靶向性聚集至损伤部位,改善血流恢复和下肢功能,而经NAC和H2O2预处理的iPS细胞无此作用。综上结果可推断,适量的活性氧对iPS细胞的生物学功能是至关重要的,对iPS细胞治疗中的靶向作用也是十分重要的。
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