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乳制品质量安全是备受关注的食品安全问题之一,它关系到人类的健康及经济的发展。金葡菌是一种在自然界到处存在的人兽共患病菌,由金葡菌引起的食物中毒已成为世界性卫生问题,尤其是近年来的乳品问题,引起了越来越多的关注。然而,传统的检测方法耗时长、灵敏度低、操作繁琐,不能满足基层工作站快速检测的需求,而且,牛奶的成分十分复杂,其中的脂肪、蛋白质、金属离子等均会干扰检测结果,因此,消除牛奶中干扰检测的因子,将金葡菌从牛奶中快速分离出来,建立一种牛奶中金葡菌快速、灵敏、可靠、特异的检测方法具有十分重要的意义。首先制备金葡菌的多克隆抗体,鉴定纯化后,进行磁珠的包被制成免疫磁珠,用来分离牛奶中的金葡菌。以鼠伤寒沙门氏菌、痢疾志贺氏菌、大肠杆菌、大肠杆菌O157:H7、变形杆菌、蜡样芽孢杆菌为阴性对照,验证了免疫磁珠分离的特异性。通过对感染不同浓度金葡菌的牛奶进行检测,确定了该方法的灵敏度为2.81×102CFU/mL。利用LAMP方法,通过Primer Explorer V3.0设计LAMP引物,检测金葡菌的耐热核酸酶基因(nuc)。选择了几个重要参数对LAMP进行了摸索与优化,最终确定了反应体系:2.5μL10×buffer,0.6mMdNTP,0.2μM外引物,1.6μM内引物,0.8M Betaine,4mM MgCl2,1μL Bst聚合酶,1μL模板。通过验证,LAMP方法具有很强的特异性,灵敏度为9.4×101CFU/mL。最后利用已经建立的免疫磁珠分离牛奶中金葡菌和LAMP检测金葡菌的方法,即IMS-LAMP方法,对人工污染金葡菌的牛奶进行检测,同时采集牛奶样品进行实际应用。对200份奶样进行检测,结果与传统国标法阳性率无显著差异,并且稳定、可靠,检测限为5.0CFU/mL。本论文初步将免疫磁珠分离技术和环介导等温扩增技术联合应用到牛奶中金葡菌检测方面,建立了一种特异、灵敏的金葡菌实验室检测方法,为快速检测试剂盒的研发工作提供理论参考。