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背景和目的乳腺癌是我国女性患者常见的恶性肿瘤,特别是三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC),因其治疗效果较差,严重威胁患者的生命健康。阿霉素是临床上治疗乳腺癌常用的化疗药物,但有部分患者在临床治疗中或治疗后出现局部复发或远处转移,并且对其他化疗药物也容易产生耐药性。如何克服化疗药物耐药是目前TNBC治疗的难点。ATP结合盒(ATP-binding cassette,ABC)转运蛋白家族是一类在体内广泛分布的跨膜蛋白,包括P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp/ABCB1)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(adenosine triphosphate binding cassette transporter protein superfamily member G2,ABCG2)等。该蛋白家族的主要功能是通过水解ATP产生的能量驱动结合底物(药物、代谢物和其他化合物)的跨细胞膜运输。因此它们能够帮助癌细胞保护自身不受细胞生长抑制剂的伤害,在肿瘤耐药中扮演着重要角色,是决定化疗是否能够取得成功的关键。因此为了探讨阿霉素对TNBC患者治疗后产生耐药的机制,本课题选择MDA-MB-231细胞株为研究对象,采用合适浓度的阿霉素处理该细胞,采用多种方法分析存留细胞中ABCG2、P-gp和ERCC1的表达情况,以及对其他化疗药物的耐受情况。初步分析乳腺癌细胞对阿霉素及其他化疗药物产生抵抗的可能机制。方法首先选择合适浓度的阿霉素体外处理MDA-MB-231细胞株,选择处理后存留细胞为研究对象,采用CCK-8法测定并计算该细胞对顺铂的耐药程度,采用Western blot检测ABCG2、P-gp、ERCC1蛋白在经阿霉素干预后在MDA-MB-231细胞中的表达情况。结果1.阿霉素对MDA-MB-231细胞的抑制率呈剂量依赖性效应,即随着阿霉素浓度的增高,对该乳腺癌细胞的抑制率也不断增加。计算出阿霉素对乳腺癌MDA-MB-231细胞的IC50为1.25μg/ml,选择1/2IC50浓度作为后续的实验操作。2.选择存留细胞,采用CCK-8的方法检测该细胞对顺铂的耐药程度。结果显示,随着阿霉素干预时间的延长,该细胞对顺铂产生一定的抵抗。3.Western blot结果显示,经阿霉素干预8h及24h后的细胞P-gp、ABCG2、ERCC1蛋白表达量较未干预的细胞明显增高,且随着干预时间的延长,P-gp、ABCG2、ERCC1蛋白的表达量也依次增加。结论1.MDA-MB-231细胞经阿霉素体外干预后,P-gp、ABCG2蛋白出现了表达增加。2.经阿霉素体外干预后存留的MDA-MB-231细胞中发现ERCC1蛋白表达增加,同时对顺铂也出现了一定的耐受。