目的：为了深入研究绵羊MHC基因序列classⅠ区段中基因的结构，构建以美利奴羊五种内脏器官为材料的cDNA文库，并对该文库进行质量评定，以美利奴羊BAC文库中含有MHC片段的141C4号阳性克隆为材料通过酶切末端标记制备放射性探针，与已构建的cDNA文库进行原位杂交以筛选含有MHC classⅠ区段基因序列目的克隆，通过对目的克隆测序及生物信息学分析，研究141C4号克隆中基因的组成结构。 方法：⑴以美利奴羊五种内脏器官为材料构建cDNA文库，对文库中的阳性克隆进行酶切鉴定，对插入片段大于500bp的阳性克隆进行测序，测序结果经过软件Sequence Scanner V1.0去除冗余序列，处理后的序列在GenBank公共数据库中BlastX比对分析，获得的信息在KEGG数据库进行多肽功能分析；⑵对美利奴羊BAC文库141C4号克隆进行测序，将其酶切后通过末端标记制备成具有放射性的探针，通过噬菌斑原位杂交筛选构建好的cDNA文库，通过放射自显影获得目的克隆，通过对目的克隆测序及生物信息学分析，研究141C4号克隆中基因的组成结构。 结论：①对美利奴羊cDNA文库进行质量评定，库容文库的库容量约为3.28×105pfu，扩增后文库的滴度为4.405×108pfu/ml，选取随机克隆酶切电泳验证，重组98.4％，平均插入片段1.5kb，获得的数据表明该文库质量较高，随机挑取阳性克隆测序获得256个独立序列，通过对这些序列进行BlastX比对和KEGG功能分析，将其按照编码的蛋白质所执行的功能分类；②以美利奴羊BAC文库141C4号克隆为材料制备的放射性探针，通过噬菌斑原位杂交方法筛选cDNA文库，尚未获得杂交信号，此项工作尚在进行中。