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多囊卵巢综合征（Polycystic ovary syndrome,PCOS）是育龄期妇女相对常见的生殖内分泌和代谢紊乱性综合征,是导致无排卵性不孕的常见病因。PCOS发病率高达6%～8%,PCOS患者具有高度异质性,可合并月经紊乱、不孕、肥胖、胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）和代谢综合征等。胰岛素是体内唯一降血糖的激素,能促进糖原、脂肪和蛋白质合成。胰岛素也是一种重要的性激素代谢的调节物,能刺激黄体生成素分泌,促进卵泡膜细胞增生,增加雄激素合成,募集大量未成熟卵泡,抑制成熟卵泡形成。胰岛素抵抗指对胰岛素敏感性降低或者外周组织对激素的调节作用反应性降低,从而导致血清中胰岛素增加来维持正常的血糖水平。稳态模型的胰岛素抵抗指数（the homeostasis model assessment of IR,HOMA-IR）被国内外学者广泛用于评估胰岛素抵抗程度,以空腹血糖与空腹胰岛素的值来计算。体质量指数（body mass index,BMI）是国际上被用于衡量成人身体健康及胖瘦的程度的一个指标,以身高与体重的值来计算。研究表明,HOMA-IR与BMI有着密切的联系,相互影响,相互作用。为了研究及提高助孕胰岛素抵抗患者成功率,我们研究的第一部分回顾性收集了正常 BMI 的首次进行体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET）助孕的PCOS和非PCOS患者的临床资料,进行相应的统计学分析以找到合适的HOMA-IR和BMI的值来达到提高妊娠率的目的。第二部分通过建立PCOS-IR大鼠模型及胰岛素抵抗人卵巢颗粒细胞（a steroidogenic human granulosa-like tumor cell line,KGN）细胞模型,采用干扰技术,旨在研究长链非编码核糖核酸母系表达基因3（long non-coding ribonucleic acid maternally expressed gene 3,LncRNA MEG3）及胰岛素样生长因子 2 结合蛋白 2（insulin like growth factor 2 binding protein 2,IGF2BP2）在 PCOS 胰岛素抵抗中的机制,为PCOS胰岛素抵抗患者提供新的治疗靶点和途径,为提高临床妊娠率提供新的思路和方向。第一部分HOMA-IR在IVF助孕患者临床妊娠率中的预测作用[研究目的]1.分析胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）预测正常体质量指数（BMI）不孕患者行首次体外受精-胚胎移植（IVF-ET）助孕的多囊卵巢综合征（PCOS）患者和非PCOS患者的临床妊娠率的截断值。2.分析在不同的体质量指数（BMI）时,胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）与PCOS患者和非PCOS患者临床妊娠率的关系。[材料与方法]1.回顾性收集山东大学附属生殖医院在2018年12月-2019年6月期间首次接受IVF-ET助孕的329例患者的临床资料,年龄在21-40岁,BMI＜25 kg/m2,根据2018年中国PCOS诊断标准将患者分为PCOS组（n=1 15）和非PCOS组（n=214）。2.比较两组间基线资料和助孕指标的差异,分析两组之间不同HOMA-IR与临床妊娠率的关系,评估不同BMI时两组患者HOMA-IR对临床妊娠率的预测意义。[结果]1.与非PCOS组比较,PCOS组有较高水平的BMI、抗苗勒氏管激素（AMH）、硫酸脱氢表雄酮（DHEAS）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）、空腹胰岛素（FINS）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL-C）、HOMA-IR、窦卵泡数（AFC）、扳机日雌二醇（E2）、生化妊娠率、优势卵泡数、获卵数、受精数和优质胚胎数（p＜0.05）;PCOS组有较低的促性腺激素（Gn）量、扳机日内膜（Em）厚度和移植胚胎数（p＜0.05）。2.单变量分析显示在非PCOS组,BMI、LH、FINS和HOMA-IR与临床妊娠率相关（p＜0.05）;PCOS 组,FINS、HOMA-IR 和收缩压（SBP）与临床妊娠率相关（p＜0.05）。多变量分析显示在非PCOS组调整BMI、LH和FINS后,HOMA-IR与临床妊娠率明显相关（OR=0.045,95%CI:0.005-0.386,p＜0.05）。3.在非PCOS组,HOMA-IR≥2.2时,临床妊娠率明显下降（p＜0.05）;在PCOS组,HOMA-IR≥3.15 时,临床妊娠率明显下降（OR=0.15,95%CI:0.044-0.507,p＜0.05）。4.在非PCOS组中,当BMI＜21.45 kg/m2并且HOMA-IR≥2.2时,临床妊娠率下降,HOMA-IR=3.15 是预测临床妊娠率的截断值（OR=0.028,95%CI:0.003-0.234,p＜0.05）;当 21.45≤BMI＜25kg/m2并且 HOMA-IR≥1.56 时临床妊娠率显著下降（OR=0.196,95%CI:0.055-0.704,p＜0.05）。在 PCOS 组中,当 BMI＜21.45 kg/m2时,临床妊娠率随着HOMA-IR增加而下降,但是无明显的截断值;当21.45≤BMI＜25 kg/m2并且 HOMA-IR≥3.15 时临床妊娠率显著下降（OR=0.186,95%CI:0.04-0.872,p＜0.05）。[结论]HOMA-IR和BMI对行IVF-ET助孕的不孕患者的临床妊娠率有影响。较高的BMI可能增加不孕患者胰岛素抵抗的程度。合适的HOMA-IR和BMI可能为不孕患者带来更好的IVF助孕结局。第二部分LncRNAMEG3通过与IGF2BP2结合参与PCOS胰岛素抵抗颗粒细胞的增殖和凋亡[研究目的]长链非编码核糖核酸母系表达基因3（LncRNA MEG3）已被证实与肝脏胰岛素抵抗（IR）相关,但在多囊卵巢综合征胰岛素抵抗（PCOS-IR）中的潜在机制尚不清楚。本研究旨在研究lncRNAMEG3在PCOS-IR中的作用机制,及与胰岛素样生长因子2结合蛋白2（IGF2BP2）的潜在相互作用,为PCOS-IR患者提供新的治疗靶点和途径。[材料与方法]1.随机挑选20只Sprague-Dawley（SD）大鼠。其中10只大鼠,皮下注射脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）6mg/100g,同时喂以高脂饲料建立 PCOS-IR 大鼠模型;其中10只对照组大鼠正常饲料喂养。HE染色观察卵巢组织的病理形态,ELISA试剂盒检测大鼠血清中卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）、空腹血糖（FPG）和空腹胰岛素（FINS）的含量,qRT-PCR检测卵巢组织和血清中lncRNA MEG3的表达水平。2.胰岛素抵抗KGN细胞转染短发夹RNA（shRNA）-lncRNAMEG3进行干扰后,CCK-8试剂盒检测细胞活力,TUNEL试剂盒检测细胞凋亡水平。利用starbase数据库预测了 lncRNA MEG3和IGF2BP2的组合,并通过RIP技术和荧光素酶报告基因进行验证。采用Western blot检测PCOS-IR大鼠卵巢组织和IR细胞模型中IGF2BP2的表达,及干扰lncRNA MEG3和过表达IGF2BP2后IGF2BP2和凋亡相关蛋白Bcl-2、Survivin和Bax的表达。[结果]1.在PCOS-IR大鼠的血清和组织中,lncRNA MEG3的表达高于对照组（p＜0.001）;在IR的细胞模型中,lncRNAMEG3的表达高于对照组（p＜0.001）。2.转染shRNA-lncRNA MEG3增加了 IR颗粒细胞的活性,抑制了细胞凋亡（p＜0.001）。3.在PCOS-IR大鼠的组织和IR的细胞模型中,IGF2BP2的表达高于对照组（p＜0.001）。4.1ncRNA MEG3主要分布在细胞质中,转染shRNA-lncRNA MEG3后抑制IGF2BP2的表达,lncRNAMEG3与IGF2BP2可能结合起作用（p＜0.001）。5.过表达IGF2BP2部分阻断转染shRNA-lncRNA MEG3对胰岛素抵抗细胞增殖和凋亡方面的作用。[结论]通过PCOS-IR动物模型及IR颗粒细胞模型实验证实,LncRNA MEG3通过与IGF2BP2结合参与胰岛素抵抗颗粒细胞的增殖和凋亡。LncRNAMEG3表达的调控可能为治疗多囊卵巢综合征胰岛素抵抗提供新的方向。