利福平微球—原位凝胶复合缓释载体的研究

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本研究的目的在于建立经纤维支气管镜肺部介入治疗的药物缓释载体,以期达到提高药物在肺部的滞留性,使药物缓慢、持续的释放,达到减少给药次数,提高患者顺应性的目的。本文首先系统地考察了模型药物利福平(Rifampicin:RFP)的理化性质,具体研究了利福平的水溶性、油/水分配系数,对光、湿稳定性以及利福平的溶液稳定性,根据实验结果,较为系统地研究了影响利福平溶液稳定性的因素,并筛选出1%EDTA-2Na+1%Na2SO3作为抗氧化剂,保证其水溶液在24h内稳定,为下一步评价制剂特性的研究提供依据。其次以聚乳酸-羟基乙酸(poly(lactic-co-glycolic acid):PLGA)为辅料,采用乳化-液中干燥法制备了1μm和140μm两种粒径的RFP-PLGA微球,其载药量分别是(2.47±0.12)%、(26.28±0.80)%,包封率分别为(4.54±0.18)%、(69.63±3.64)%,通过粒径分布、差示扫描热量法、电子扫描显微镜对微球进行表征,体外释药实验显示1μm微球11天释放较完全,140μm微球30天释放35%。制备了温度敏感型、离子敏感型、温度-离子双敏型原位凝胶,通过凝胶黏度、体外溶蚀率、体内滞留时间等因素对处方进行优化后,采用凝胶溶液直接高压灭菌的方法,制得了无菌原位凝胶系统。通过对家兔肺部安全性初步评价,筛选出在制备的几种原位凝胶体系中安全性最好的离子敏感型原位凝胶系统。本文最后制备了RFP-PLGA微球与离子敏感型原位凝胶的复合缓释载体,采用荧光活体成像技术对复合缓释载体的体内滞留性进行评价,结果显示1μmRFP-PLGA微球-离子敏感型原位凝胶复合缓释载体在小鼠体内的滞留时间为21-28天。进一步采用改良后的肺泡灌洗技术(broncho alveolar lavage:BAL)提取肺部局部游离药物,高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography:HPLC)法测定大鼠肺部药物浓度,评价药物在体释放行为。结果显示复合缓释载体在体内给药后5h药物浓度达到峰值(48.60±15.67)mg·mL-121天时的药物浓度(0.81±0.14) mg·mL-1,较好地达到了课题设定的目标,复合缓释载体的Beagle犬肺部安全性试验显示,Beagle犬肺部未见异常,安全性良好。
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