尾加压素-II和转化生长因子-β1在哮喘气道重塑中的作用及调控

来源 :温州医学院 温州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:goblinzehong
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目的:   1.研究尾加压素-Ⅱ(U-Ⅱ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑中的作用。   2.探讨U-Ⅱ与TGF-β1在哮喘气道重塑发生发展中的相关性。   3.观察布地奈德(BUD)、姜黄素(Cur)对哮喘气道重塑及U-Ⅱ、TGF-β1表达的调控作用。   方法:   SPF级雄性SD大鼠96只,4~6周,100~120克,用卵白蛋白(OVA)致敏与激发,建立哮喘大鼠气道重塑模型。96只大鼠随机分为正常对照组(N组)、哮喘组(A组)、布地奈德组(B组)和姜黄素组(C组),每组24只,各组分别在第2周、第4周组和第8周处死大鼠各8只。各组大鼠分别在激发后1~2h处死,留取标本备测。图像分析技术测定肺内支气管壁厚度(Wat)和支气管平滑肌厚度(Wam);酶联免疫吸附实验法(ELISA)测定血清和支气管肺泡灌洗液(BALF)中U-Ⅱ和TGF-β1的含量;免疫组化(IHC)检测肺组织U-Ⅱ和TGF-β1表达;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织匀浆中U-ⅡmRNA和TGF-β1mRNA的表达。   结果:   1.光镜   正常对照组支气管和血管周围未见炎性细胞浸润,支气管平滑肌未出现增厚。哮喘组可见支气管和血管周围炎性细胞浸润,以淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞为主;A4、A8组可见管腔内粘液栓,基底膜增厚,支气管壁增厚、胶原沉秋等。各干预组炎性细胞明显减少,其它病理改变较哮喘组减轻。   2.支气管壁厚度和支气管平滑肌厚度2.1支气管壁厚度的比较(μm2/μm)   A2组(48.94±1.51)、A4组(53.56±2.44)、A8组(64.00±2.57)与N2组(29.51±1.71)、N4组(30.46±1.04)、N8组(32.17±1.24)比较存在显著性差异(P<0.01);A4组、A8组与A2组比较存在显著性差异(P<0.01),A8组与A4组比较呈显著性差异(P<0.01);B2组(39.05+0.71)、C2组(41.24±0.81)与A2组比较存在显著性差异(P<0.01),B2组、C2组与N2组的比较呈显著性差异(P<0.01),B2组和C2组之间比较无显著性差异(P>0.05);B4组(42.91±1.34)、C4组(46.10±1.18)与A4组比较存在显著性差异(P<0.01),B4组、C4组与K4组比较存在著性差异(P<0.01),B4组与C4组之间比较无显著性差异(P>0.05);B8组(49.91±1.21)、C8组(52.47±1.29)与A8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组、C8组与N8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组与C8组比较无显著性差异(P>0.05)。   2.2支气管平滑肌厚度的比较(μm2/μm)   A2组(18.61±1.41)、A4组(22.01±1.63)、A8组(27.97±2.13)与N2组(12.68±1.93)、N4组(13.02±0.76)、N8组(13.11±1.27)比较存在显著性差异(P<0.01);A4组、A8组与A2组比较存在显著性差异(P<0.01),A8组与A4组比较呈显著性差异(P<0.01);B2组(15.11±0.82)、C2组(15.94±0.75)与A2组比较存在显著性差异(P<0.01),B2组、C2组与N2组的比较呈显著性差异(P<0.01),B2组和C2组之间比较无显著性差异(P>0.05);B4组(15.82±0.63)、C4组(16.79±0.68)与A4组比较均存在显著性差异(P<0.01),B4组、C4组与N4组的比较存在显著性差异(P<0.01),B4组与C4组比较无显著性差异(P>0.05);B8组(20.06±1.33)、C8组(22.41±0.93)与A8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组、C8组与N8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组和C8组之间比较无显著性差异(P>0.05)。   3.血清和BALF中U-Ⅱ和TGF-β1含量   3.1血清中U-Ⅱ浓度比较(ng/ml)   A2组(48.22±4.40)、A4组(73.61±8.09)、A8组(102.21±12.96)与N2组(7.76±1.06)、N4组(8.2±0.56)、N8组(8.55±0.95)比较存在显著性差异(P<0.01);A4组、A8组与A2组比较存在显著性差异(P<0.01),A8组与A4组比较呈显著性差异(P<0.01):B2组(26.04±2.31)、C2组(32.92±2.14)与A2组比较存在显著性差异(P<0.01),B2组、C2组与N2组的比较呈显著性差异(P<0.01),B2组和C2组之间比较无显著性差异(P>0.05);B4组(28.45±1.41)、C4组(33.82±3.55)与A4组比较存在显著性差异(P<0.01),B4组、C4组与N4组的比较存在显著性差异(P<0.01),B4组与C4组比较无显著性差异(P>0.05);B8组(54.85±2.36)、C8组(61.17±3.11)与A8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组、C8组与N8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组和C8组之间比较无显著性差异(P>0.05)。   3.2 BALF中U-Ⅱ浓度比较(ng/ml)   A2组(56.06±2.82)、A4组(78.51±3.61)、A8组(102.21±12.96)与N2组(2.74±0.17)、N4组(2.88±0.37)、N8组(3.01±0.32)比较存在显著性差异(P<0.01);A4组、A8组与A2组比较均存在显著性差异(P<0.01),A8组与A4组比较呈显著性差异(P<0.01);B2组(24.52±0.61)、C2组(30.17±2.52)与A2组比较均存在显著性差异(P<0.01),B2组、C2组与N2组比较呈显著性差异(P<0.01),B2组和C2组之间比较无显著性差异(P>0.05);B4组(36.11±1.73)、C4组(44.17±1.44)与A4组比较均存在显著性差异(P<0.01),134组、C4组与N4组比较存在显著性差异(P<0.01),B4组与C4组比较无显著性差异(P>0.05);B8组(55.30±2.86)、C8组(55.34±1.29)与A8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组、C8组与N8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组与C8组之间比较无显著性差异(P>0.05)。   3.3血清中TGF-β1浓度比较(pg/ml)   A2组(1578.7±74.98)、A4组(2322.4±94.43)、A8组(2643.7±74.5)与N2组(393.4±41.78)、N4组(408.17±35.33)、N8组(407.25±42.06)比较存在显著性差异(P<0.01);A4组、A8组与A2组比较存在显著性差异(P<0.01),A8组与A4组比较呈显著性差异(P<0.01);B2组(729.8±43.52)、C2组(907.4±39.12)与A2组比较均存在显著性差异(P<0.01),B2组、C2组与N2组的比较也具有显著性差异(P<0.01),B2组和C2组之间比较无显著性差异(P>0.05);B4组(1168.1±73.81)、C4组(1222.1±72.95)与A4组比较均存在显著性差异(P<0.01),B4组、C4组与N4组的比较存在显著性差异(P<0.01),B4组与C4组比较无显著性差异(P>0.05);B8组(1265.3±60.59)、C8组(1534.2±59.71)与A8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组、C8组与N8组比较存在显著性差异(P<0.01),B8组与C8组之间比较无显著性差异(P>0.05)。   3.4 BALF中TGF-β1浓度比较(pg/ml)   4.IHC检测肺组织中U-Ⅱ、TGF-β1蛋白表达   5.RT-PCR法测肺组织匀浆中U-ⅡmRNA、TGF-β1 mRNA表达   6.相关分析   结论:   1.U-Ⅱ和TGF-β1在哮喘大鼠气道重塑中表达增高,U-Ⅱ和TGF-β1的高表达可能促进了哮喘气道重塑的发生和发展。   2.U-Ⅱ与TGF-β1的表达呈正相关,U-Ⅱ的表达失衡可能通过改变TGF-β1的表达来促进哮喘的气道重塑。   3.布地奈德和姜黄素均可减轻哮喘气道重塑,可能与调控U-Ⅱ和TGF-β1的表达有关。
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