岩黄连化学成分及抗肿瘤活性研究

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岩黄连(Corydalis saxicola Bunting)是罂粟科紫堇属植物。因其功效与黄连相似且习生于高山岩洞或悬崖峭臂上而得名,分布于贵州、云南、四川等省,在广西多见于桂西及桂西北等地,以东兰、巴马、都安、靖西、德保较多。岩黄连性凉,味苦,具有清热解毒、利湿、止痛止血之功效,民间常用来治疗急性黄疸型肝炎、肝硬化、肝癌等疾病。本研究通过传统的分离手段(正相/反相硅胶柱层析,重结晶,MCI柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱)和现代分离技术(HPLC)等分离手段对岩黄连乙醇提取物的乙酸乙酯和二氯甲烷萃取部位进行了化学成分分离纯化,利用理化性质和波谱分析等方法结合文献报道的数据,从岩黄连中分离鉴定了 38个单体化合物(1-38),包括9个木脂素酰胺类(1-9),19个异喹啉生物碱类(10-28),和10个其它类化合物(29-38)。它们分别为Corydalisin A(1),Corydalisin B(2),Corydalisin C(3),Cannabisin F(4),Cannabisin E(5),Cannabisin D(6),1,2-dihydro-6,8-dimethoxy-7-hydroxyl-1-(3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl)-N 1,N2-bis[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]-2,3-naphthalene dicarboxamide(7),Grossamide(8),N-trans-Feruloyl Tyramine(9),Corydalisine A(10),Ophiocarpine(11),四氢非洲防己胺(12),(-)-卡维丁(13),Tetrahydrocoptisine(14),Tetrahydroberberine(15),白蓬叶碱(16),四氢巴马汀(17),Neooxyberberine acetone(18),巴马汀(19),Dehydroscoulerine(20),Dehydrocorydaline(21),非洲防己胺(22),Corydalisine B(23),8-氧化黄连碱(24),原阿片碱(25),8-甲氧基二氢血根碱(26),二氢血根碱(27),二氢白屈菜红碱(28),对羟基苯乙酸(29),对羟基苯乙酸甲酯(30),对羟基苯甲酸(31),3,4-二羟基苯甲酸(32),咖啡酸(33),4-甲氧基-4-氧代-2-丁烯酸(34),Dihydrophaseic acid(35),七叶亭(36),2-(3’,4’-二羟苯基)-1,3-胡椒环-5-醛(37),山柰酚(38)。其中,1,2,3,10,23为新化合物,4-9,11,14,18,20,21,24,26,29-38为首次从岩黄连中分离得到。利用活性引导法对乙酸乙酯部位进行分离提纯,并对分离得到的8个木脂素酰胺类化合物进行了抗肿瘤活性测试,结果表明化合物3对MGC-803和T24细胞株显示出较好的活性(IC50=8.81和9.62μM)。同时,我们以MGC-803细胞为体外药理实验模型,初步探讨了化合物3诱导MGC-803细胞凋亡的分子机制。用Annexin V/PI共染色,Hoechst 33258荧光染色,AO/EB染色,JC-1和流式细胞术检测化合物3对肿瘤细胞凋亡的影响,并采用ROS测定实验初步探讨了化合物3的凋亡诱导机制。结果表明具有较好的抗肿瘤活性的化合物3是通过诱导MGC-803细胞凋亡而杀死该肿瘤细胞的。
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