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番茄近缘野生种是番茄进行遗传改良取之不竭的基因库,据统计在番茄野生种中已发现了42种番茄病害的抗源,并有一半以上被转育到栽培番茄中,目前所发现的番茄叶霉菌抗性基因均是从自近缘野生种中转育而来.我们对番茄叶霉病的抗性育种所采取的策略是,利用基因工程的方法,建立骨干亲本的近等基因系,培育出具有抗不同叶霉菌生理小种的品种,在生产中配合使用.获得赋予不同叶霉菌生理小种的抗性cf基因是实施这一策略的关系.茄科番茄近缘野生类番茄茄(S.lycopersicoides)具有很好的抗逆特性,是番茄遗传改良不可多得的材料.最近我们对该种的LA2386叶霉菌抗生研究结果表明,对叶霉菌(生理小种1.2.3)侵染达到免疫程度.基于此,我们用叶霉菌(生理小种1.2.3)给LA2386接种,接种后在0-120h分15次取样抽RNA,用由CLONTECH公司提供的SMART cDNA Library Construction Kit构建了滴度为1.81×<6>的cDNA文库,同时,以LA2386基因组为模板,用PCR法获得了叶霉菌抗性基因Hcr9和Hcr2两个同源家族的探针.该研究是以番茄作为反应器生产sCT,拟达到吃表达sCT的番茄可以预防或治疗骨质疏松的目的.目前,我们的研究已取得了很好的进展:①基于提高sCT活性,对天然sCT氨基酸残基进行了部分置换和删除,同时按植物偏受密码子原则设计合成了包括酶切位点在内的共137bp的sCT基因(ORP=102bp);②构建了以CaMV35Spromoter驱动的sCT植物表达载体p35S-2300- sCT;③通过转化模式植物烟草,PCR检测已获得21株阳性植株,进一步分子检测(Southern blot和Western blot)正在进行中;④从番茄中通过PCR法获了1.1kb番茄果实特异表达启动子pE8;⑤已开始着手构建和准备Pe8驱动的sCT植物表达载体Pe8-2300- sCT和表达sCT番茄喂饲动物的功能验证工作.