复方南星止痛膏处方由生天南星、生川乌、丁香、肉桂、白芷、细辛、川芎、徐长卿、乳香、没药、樟脑、冰片等12味药材组成,具有散寒除湿、活血止痛之功效,临床主要用于治疗寒湿瘀阻所引起的骨性关节炎及类风湿性关节炎,包括关节疼痛、肌肉肿胀等,疗效确切,应用广泛。产品上市20余年来,逐渐发展成骨性关节炎及类风湿关节炎的临床一线用药,由于其较好的疗效,在临床上受到医生和患者的广泛认可,为国家基本药物目录甲类品种,具有较好的临床优势和市场前景。目前,复方南星止痛膏的研究主要集中在质量控制、药理作用、临床疗效等方面,关于其药效物质基础的研究甚少。随着现代分析技术的发展,该制剂的质量控制标准已不能满足全面可控、绿色环保、科学合理的质控技术要求。因此,有必要采用更先进的技术和更合适的评价指标对复方南星止痛膏进行质量标准提升研究,以更好地控制产品质量的均一、稳定。本论文采用超高效液相-四级杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q-TQF-MS/MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对制剂的化学成分谱及体外透皮吸收成分谱进行分析,在此基础上建立基于主要透皮吸收成分的质量控制方法,使指标性成分的选择更科学合理,进而提高产品的质量控制水平。本论文具体研究内容包括以下几个方面:1.复方南星止痛膏化学成分谱及透皮吸收成分谱研究采用UPLC-Q-TQF-MS/MS技术和GC-MS技术对复方南星止痛膏的化学成分进行定性分析,共鉴定出115个化合物。其中UPLC-Q-TQF-MS/MS技术鉴定出60个化合物,包括6个氨基酸类,10个酚酸类,17个生物碱类,8个黄酮类,4个川芎内酯类,7个香豆素类,2个苯丙素类及6个其他类化合物,其中12个化合物已经过对照品比对确认。采用GC-MS技术鉴定出55个化合物,包括单萜类及其含氧衍生物7个,倍半萜类及其含氧衍生物24个,芳香族类16个,有机烷、醇、酯类8个,其中7个化合物已经过对照品比对确认。该研究从非挥发性成分和挥发性成分两个方面完善了制剂的化学成分谱信息,为其质量控制及药效物质基础研究提供依据。采用体外透皮吸收模型,考察复方南星止痛膏可能的透皮吸收成分。实验首先考察并确定了透皮接收液的组成及样品前处理方式,然后采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对制剂体外透皮吸收实验的接收液进行定性分析,通过与空白基质、制剂化学成分谱的对比分析,共鉴定出22个透皮成分,包括11个挥发性成分,4个内酯类成分,4个香豆素类成分及3个双酯型乌头生物碱类成分。22个透皮成分均包含在制剂化学成分谱中,且全为化学成分谱研究中的原型成分,未曾找到发生代谢的成分。2.复方南星止痛膏质量标准提升研究.基于化学成分谱及体外透皮吸收研究结果,从定性鉴别、含量测定、常规检查等方面对制剂的质量标准进行提升研究。试验首先增加了白芷、川芎2味药材的薄层鉴别、挥发性成分的多指标含量测定和马兜铃酸Ⅰ的限量检查,优化了挥发性成分的气相鉴别、次乌头碱的含量测定以及制剂的常规检查方法,为有效控制产品质量、保证批间一致性提供技术支持。同时,为了进一步提升产品的质量控制水平,重点针对制剂中的有效成分,即三个双酯型乌头生物碱(新乌头碱、乌头碱、次乌头碱),建立了多成分同时测定的在线中心切割的超高效二维液相色谱法(2D-UPLC),并经系统的方法学验证,证明方法的可行性。该方法对中药复杂体系中微量成分的质量控制提供了有益借鉴。