成年大鼠脊髓不全横断后的自发运动功能恢复及脊髓全横断模型的建立

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成年哺乳动物脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后缺乏再生能力,但脊髓不全损伤后可出现显著的自发性运动功能恢复。这种自发性的功能恢复与残留的下行运动纤维有着密切的关系。以往对大鼠脊髓分级挫伤后残留纤维的量与运动功能恢复程度之间的关系进行过系统的研究,但对脊髓不全横切,尚缺乏这方面的研究。 进行脊髓损伤与再生研究的基本前提是建立理想的SCI模型。近年,越来越多的脊髓再生研究采用脊髓全横断模型,但脊髓全横断模型在具体应用时尚有一些问题。首先,在如何保证全横断的彻底性上,不同的实验者虽采用不同的方法,但并无一种可靠、简便而又损伤较小的理想方法。其次,大鼠脊髓中重度挫伤后30天内的死亡率可高达50-70%,脊髓完全横断后的死亡率更高,这对实验观察带来极大的困难。因此,如何采取措施提高实验动物的术后存活率成为实验顺利实施的关键因素之一。 本研究的一部分利用尖刀片横切的常规脊髓全横断方法横断 第四军医大学硕士学位论文 断12只雄性成年SD大鼠Tg节段脊髓,术后发现42%的实验动 物出现不同程度的运动功能恢复。恢复最差的BBB评分为7分, 表现为后肢三关节依靠地面的大范围划行;恢复最好的BBB评 分为19分,除少量缺陷外后肢行走接近正常。脊皖损伤部位连 续矢状切片证实出现功能恢复的动物在脊髓腹侧及腹外侧部存在 数量不等的残留纤维。借助计算机重建损伤部位脊髓横截面,显 示残留纤维的分布范围并计算残留纤维的量占脊髓横截面的比 例,发现残留纤维的比例与动物术后运动的BBB最高评分之间 呈明显的正相关片系k七0.973X 并且不到4%的纤维残留就可 恢复后肢全部关节的活动。 研究者在近两年的 SCI研究卜t,反复探索,试图改良或找出新 的既简便易行、损伤较轻而又彻底消除帅经纤维残留的脊锄全横 断方法。本研究第二邻分实验一比较了包括传统、作眷改良和创 新在内的四种不 11 U脊涸个横断方法在横断的彻底性及损伤的程度 方面的不同,证实了山我们创立的一种新的脊湖全横断方法具有 横断彻底、损伤小的优点,足一种理想的肾颁全帧断模型。这种 方法是:切除椎饭绣露汗硼后,以尖刀片山脊棚左侧迅速轻划至 中线部泣,划汗仟湖软)漠及背侧邪分组织,再在同一平面出右侧 快速轻划至中线,再沿这一切口以同样方法分层依次切断脊腿, 最后抬起脊髓两侧断端,确认脊髓完全横断。 为了提高脊髓全横断后动物的存活率,本研究第二部分实验 二针对术后动物死亡的可能原因,在参考其它文献的基础上,制 定了一套大鼠脊髓严重损伤后的护理方案。这一方案主要解决了 大鼠脊曲全横断后的尿醋留、肢体受压水肿溃烂及感染问题。应 用该方案进行护理,脊髓全横断大鼠的术后死亡率由75%降到 23%以下。 3第四军医大学硕士学位论文
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