目的：构建含汉坦病毒截短核蛋白基因的重组质粒，并在原核表达系统产气荚膜梭菌中表达，为汉坦病毒鼠用口服疫苗的研制做好前期工作。 方法：以重组质粒pGEX-4T-2/SA为模板，PCR扩增汉坦病毒截短核蛋白基因片段。Ec081Ⅰ、BspT104 Ⅰ双酶切PCR产物和质粒pJRC200，胶回收酶切产物，T4连接酶连接，构建重组质粒pJRC200-SA，转化E.coli DH5a，菌液PCR、酶切、测序鉴定。将pJRC200-SA电穿孔转化产气荚膜梭菌，先行厌氖增菌培养，后产芽孢培养诱导汉坦病毒截短核蛋白表达。超声裂解产气荚膜梭菌芽孢，对裂解产物进行SDS-PAGE、Western blot鉴定。 结果：PCR扩增获得约580bp大小基因片段，与目的片段大小相符。菌液PCR得到约580bp大小基因片段，证明插入目的片段大小正确；Ec081Ⅰ、SalⅠ双酶切得到8290bp和530bp两基因片段，证明插入目的片段连接方向正确；Ec081Ⅰ、BspT104Ⅰ双酶切得到8240bp和580bp两基因片段，证明目的片段插入位置正确：测序证明插入目的片段碱基序列正确，无碱基缺失和突变。SDS-PAGE显示截短核蛋白有效表达，大小约27KDa。Western blot分析显示该截短核蛋白能与肾综合征出血热病人阳性血清特异性结合。 结论：汉坦病毒截短核蛋白重组质粒pJRC200-SA构建成功。截短核蛋白能在原核表达系统产气荚膜梭菌中有效表达，且具有良好的抗原性和特异性。为鼠用汉坦病毒口服疫苗的研制奠定了基础。