姜黄素是从草本植物姜黄的根茎中提取出来的酚类色素，药理作用广泛。近年来的研究表明姜黄素能防止小鼠及大鼠多种组织中肿瘤的发生，并能抑制人类多种肿瘤的增殖。美国国立肿瘤所(NCI)已将其列为第三代癌化学预防药。姜黄素不仅能够抑制肿瘤细胞的生长，阻遏细胞周期，诱导肿瘤细胞凋亡、分化以及抑制肿瘤组织的侵袭和转移，还可通过调节多种信号途径影响细胞增殖。但是，姜黄素抗肿瘤机制较为复杂，至今仍未完全阐明。因此，有关姜黄素在肿瘤预防和治疗中的作用及其机制值得深入研究。细胞信号转导系统控制着细胞的所有活动，参与细胞所有的生理和病理过程，细胞信号转导系统异常在肿瘤发生和发展的各个阶段都具有重要意义。胰岛素样生长因子-1(Insulin-like Growth Factor-1)及其信号通路在肿瘤的发生发展中起着十分关键的作用。IGF-1系统(或称IGF-1通路)包括IGF-1和IGF-2两种肽类激素，多种细胞膜受体，如IGF-1受体(IGF-1R)，以及至少7种与IGF有高度亲和力的结合蛋白(IGFBPs)。IGF-1R在多种肿瘤组织和细胞中过度表达，既能作为肿瘤发生的诊断标记，也是一个具有广泛运用前景的肿瘤治疗靶点。本论文的主要研究目的在于明确姜黄素体外抗癌作用与IGF-1通路的关系及其作用机制。本研究采用不同组织来源的人癌细胞株HT-29细胞，MCF-7细胞，PC-3细胞和Hela细胞以及正常人血管内皮细胞株ECV-304细胞作为体外模型，检测了姜黄素的抗细胞增殖活性，结果显示姜黄素对上述五种细胞株均具有抑制增殖作用，但对不同组织来源的细胞其抑制强度不尽相同，其中对人结肠癌HT-29细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用较强，而Hela细胞对姜黄素最不敏感，表明姜黄素抑制细胞增殖作用可能具有组织特异性，但未见明显的肿瘤细胞选择性。细胞毒性作用是姜黄素抗癌作用的一个方面。通过检测HT-29细胞培养基上清中乳酸脱氢酶释放率来考察姜黄素的细胞毒性作用。结果表明浓度超过40μM的姜黄素作用48 h以上，具有明显的细胞毒性作用。采用形态学观察、碘化丙啶(PI)单染色及AnnexinV-FITC和PI双染色流式细胞仪技术检测姜黄素诱导HT-29细胞凋亡作用。结果显示姜黄素能够阻滞细胞周期于G0／G1期，抑制肿瘤细胞S期的DNA合成，诱导HT-29细胞凋亡。进一步研究显示，姜黄素可导致线粒体膜电位下降，提高线粒体膜的通透性，促使细胞色素C从线粒体向胞液中释放，抑制Bcl-2蛋白表达，同时提高Bax蛋白表达水平，并激活Caspase-3，最终导致细胞凋亡。以HT-29细胞和MCF-7细胞作为体外模型，分析姜黄素对外源性IGF-1促增殖及抗凋亡作用的影响。MTT分析结果显示，外源性IGF-1能促进HT-29和MCF-7细胞增殖，并抑制其凋亡，而姜黄素则能明显抑制IGF-1的促增殖及抗凋亡作用。姜黄素能够干预IGF-1通路，主要表现为抑制内源性IGF-1的合成与分泌，促进IGFBP-3的分泌，抑制IGF-1介导的RTK激活，并在mRNA水平和蛋白水平上抑制IGF-1R表达。本研究还初步明确了姜黄素对IGF-1R介导的PI-3K／Akt途径和MAPK／Erk1／2信号传导途径的影响，结果显示姜黄素不仅能够显著降低IGF-1诱导的p-IGF-1R水平，抑制IGF-1R的激活，而且还能够抑制IGF-1诱导的Akt和Erk1／2蛋白磷酸化，降低p-Akt和p-Erk1／2水平，初步表明姜黄素可以通过抑制IGF-1R介导的P13K／Akt和MAPK／Erk1／2信号途径而发挥抗癌作用。PPARγ是配体激活转录因子，在多种肿瘤细胞中表达，经特异性激动剂作用后，在调控肿瘤细胞分化，增殖，凋亡等方面发挥重要作用。本研究初步探讨了姜黄素调控IGF-1R表达与PPAR-γ途径的依赖关系。结果证实姜黄素不仅可通过激活PPAR-γ途径抑制HT-29细胞生长，还可通过激活PPAR-γ途径下调IGF-1R的表达。对PPAR-γ本身来说，姜黄素可明显提高其蛋白表达水平，但对PPAR-γmRNA含量并无显著影响。总之，本研究不仅证实了姜黄素可以通过细胞毒作用、诱导凋亡作用使肿瘤细胞生长停滞并逐渐走向死亡，而且首次明确姜黄素体外抗癌作用与IGF-1通路的关系，初步阐明姜黄素干预IGF-1通路的作用及其作用机制。这将为姜黄素在人类癌的治疗和化学预防中的实际应用提供新的理论依据，也将为新型抗癌药物的研发提供一个新思路。