论文部分内容阅读
恶性肿瘤作为一种全身性疾病，其产生是由多基因、多途径及多因素参与逐步发展的复杂过程，单一疗法往往难以取得满意疗效，因此，合理地选择综合治疗的模式为有效地杀伤肿瘤细胞，彻底治愈癌症带来了希望。肿瘤基因-放射治疗的提出弥补了放射治疗与基因治疗各自的弊端，将二者有机地结合起来，发挥协同抗肿瘤作用，既增强了肿瘤组织对放射治疗的敏感性、提高外源基因靶向转移和杀伤肿瘤细胞的效率，同时也可以降低照射剂量，缓解射线对肿瘤周围正常组织的损伤。本研究利用对肿瘤细胞具有靶向性的溶瘤腺病毒作为载体，利用Egr-1启动子可在辐射诱导下增强其下游目的基因表达的特性，以及TRAIL和Smac基因的协同促肿瘤细胞凋亡的作用，构建了携带TRAIL和Smac双基因的具有双重靶向的pAd.Egr1-TRAIL-Smac-hTERT-E1A-E1B-E1B55K的溶瘤腺病毒质粒，并在HEK293细胞中成功地将其包装成携带Egr-1启动子、TRAIL和Smac双基因的双重靶向溶瘤腺病毒CRAd.pEgr1-TRAIL-Smac，探讨在其联合X射线照射对MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的影响，以及MDA-MB-231细胞凋亡途径中相关基因的mRNA和蛋白表达规律。实验结果表明，CRAd.pEgr1-TRAIL-Smac联合X射线照射对MDA-MB-231细胞具有明显的增殖抑制及其促凋亡作用，可使细胞中TRAIL、DR5、Smac、Cytc、caspase-8、-9和-3mRNA及蛋白表达增高。结果提示，CRAd.pEgr1-TRAIL-Smac联合放疗抑制MDA-MB-231细胞增殖和促进其凋亡的机制，涉及细胞S期和G2期阻滞及死亡受体途径与线粒体途径中TRAIL、DR5、Smac、Cytc、caspase-8、-9和-3等基因的相互作用。本研究结果为临床治疗肿瘤提供了重要的理论依据及实验基础。