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藿香[Agastache rugosa(Fisch.et Mey.).Kuntze]为唇形科藿香属一年生或多年生草本植物。它是常用的药用植物,也是香料植物和蔬菜,是一种重要的多用途经济植物,具有广泛的开发前景和经济价值。多倍体育种是一种在药用植物育种中广泛使用的育种方法,通常可以提高产量和药用成分含量,并能创造新的种质资源。通过对其再生体系的建立,能为优良品种的选育,细胞融合及转化等一系列工作奠定基础。转基因技术可以打破物种间生殖隔离,对原有遗传体系进行改造,为新品种选育提供了全新和有效的辅助途径。本研究利用秋水仙素碱对藿香幼苗进行加倍,获得少量纯合四倍体,并建立了藿香的再生体系,以及对农杆菌介导的遗传转化体系进行了初步探索,获得如下主要结果:(1)藿香多倍体得到诱导:以秋水仙素碱为诱导剂,类比药物共培养法和直接茎尖滴加法,发现前者加倍效果优于后者,最佳方法为:1/2MS+60mg/L秋水仙素共培养13天;加倍频率为23.33%,通过植株形态,气孔频度和大小,染色体数目的观察,已从混倍体后代中筛选出少量纯合四倍体。对藿香染色体数目进行确定,并进行核型分析。在有丝分裂中期藿香染色体长度范围为1.34～2.81μm。核型公式为K(2n)=2X=26=18=3sm+6m。染色体相对长度组成为:2n=2S+2M1+4M2+1L,2B型。(2)藿香再生体系建立:优化无菌苗制备方法,70%乙醇1分钟,0.1%升汞8分钟,无菌水冲洗3-5次,染菌率小于5%。以MS为基本培养基(0.7%琼脂,1.5%蔗糖),叶片为外植体优于茎为外植体,愈伤诱导MS+0.2mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D,诱导率100%,愈伤继代MS+0.5 mg/L6-BA+0.2mg/L 2,4-D,继代培养三个月后转入丛芽诱导培养基MS+1.5mg/L6-BA+0.05mg/L NAA,诱导丛芽率为73.7%,平均8.4个丛芽每块愈伤,诱导生根1/2MS+0.5mg/LNAA,两周后观察,生根率为91.67%,平均5.3条根每棵再生苗,经炼苗后移栽大田,存活率为82.2%。(3)再生苗变异分析:再生苗中发现部分变异苗,如六棱茎、三叶轮生,叶裂加深等。从中选取52株外观有明显差异的再生苗,进行SRAP分子标记和细胞遗传学学观察,分子标记显示遗传距离在0.45～0.93之间,部分变异苗有特异带出现,并发现部分植株存在染色体数目变异现象。(4)农杆菌介导的遗传转化体系初探:无菌苗幼嫩茎段为外植体,在愈伤诱导培养基上进行Km抗性试验表明:50mg/L的卡那霉素对愈伤诱导有极强的抑制作用。200mg/L的头孢霉素抑菌效果很好。以无菌苗幼嫩叶片为外植体,在0.6～0.80D的农杆菌中浸染10分钟后,经过48小时共培养后转入到含卡那霉素的筛选培养基上进行筛选,得到抗性愈伤,并检查到标记基因GFP蛋白的荧光在抗性愈伤中表达,抽取抗性愈伤DNA,进行PCR检测,结果表明外源基因已整合到藿香基因组中,转化率为80%。