MicroRNA PC-5p-1090靶向MARCKS并抑制细胞增殖

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为探索快速生长期马鹿(Cervus elaphus)鹿茸生长点茸皮中新发现的低拷贝microRNA PC-5p-1090的生物学功能。本研究利用microRNA PC-5p-1090的预测靶标,参与各种信号通路的一种膜结合蛋白,且是蛋白激酶C(PKC)底物的MARCKS(肉豆蔻酰化富丙氨酸激酶C底物)进行验证。通过荧光素酶报告系统以及western blot实验研究microRNA PC-5p-1090对MARCKS的调控作用,同时采用细胞增殖实验研究microRNA PC-5p-1090对细胞生理功能的影响。  结果显示:(1)当microRNA PC-5p-1090mimics与MARCKS3UTR野生型重组质粒共转染293T细胞系时,荧光素酶的表达量明显下降;而其他对照组荧光素酶的表达量无显著变化。  (2)当microRNA PC-5p-1090mimics和NC mimics(negative control,NC)分别转染Huh-7细胞系时,western blot实验和细胞增殖实验检测,microRNA PC-5p-1090mimics处理组内源MARCKS蛋白表达量显著下降,且细胞增殖受到抑制。  研究表明:MicroRNA PC-5p-1090具有生物学功能;MicroRNA PC-5p-1090可以特异性靶向MARCKS3UTR,负调控内源MARCKS基因的表达,从而抑制细胞增殖;MicroRNA PC-5p-1090负调控MARCKS基因表达的机制具有进化保守性。
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