组分中药CXWS药效学试验及指纹图谱研究

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组分中药CXWS是中医辨证理论指导下,结合现代药理学研究方法,经过组方配伍筛选研究、提取工艺研究和制剂工艺研究而制成的组分中药新药。本方由柴胡、白芍、枳壳、香附、延胡索和甘草六味中药有效部位提取物组成,用于治疗气滞型胃脘痛。本研究针对功能主治对该组分中药开展了功能性消化不良的药效学研究,基于指纹图谱技术建立柴胡提取物、白芍提取物、延胡索提取物及甘草提取物企业内控标准,开展组分中药制剂的指纹图谱研究,并对指纹图谱的共有峰进行了归属性研究。1.CXWS对功能性消化不良治疗作用的研究。通过采用夹尾激怒法和慢性应激法(断食,断水)相结合的方式诱导功能性消化不良大鼠模型,进行胃排空和小肠推进实验,统计胃排空率和小肠推进率。随后腹主动脉取血离心分离血清,根据试剂盒说明书测定血清胃肠激素相关指标。结果显示:与模型组相比,CXWS剂量组雌雄FD大鼠的胃排空率和小肠推进率均显著升高,血清中大鼠胃促生长素(Ghrelin)、胃动素(motilin,MTL)水平显著升高,血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)水平显著降低,与空白组相比,CXWS剂量组雌雄FD大鼠的各项指标无显著差异。综上,CXWS可有效改善雌雄FD大鼠胃肠运动功能,调节胃肠激素分泌水平,CXWS治疗功能性消化不良药效明确。2.CXWS中中药提取物指纹图谱研究。采用高效液相色谱法,通过对洗脱程序、色谱柱、波长、柱温、流速等的考察确立色谱条件,通过对提取溶剂种类、浓度、用量、提取方法、提取时间等的考察确立供试品溶液处理方法,进而建立CXWS涉及的中药提取物指纹图谱。结果表明:柴胡提取物指纹图谱,标定12个共有峰,10批次柴胡提取物相似度在0.922~0.959之间;白芍提取物指纹图谱,标定9个共有峰,10批次白芍提取物相似度在0.997~1.000之间;延胡索提取物指纹图谱,标定10个共有峰,10批次延胡索提取物相似度在0.930~0.980之间;甘草提取物指纹图谱,标定10个共有峰,10批次甘草提取物相似度在0.924~0.969之间。以上结果表明,研究中所建立的柴胡提取物、白芍提取物、延胡索提取物、甘草提取物指纹图谱,相似度良好,方法可靠,可作为CXWS各中药提取物的企业内控标准。3.CXWS指纹图谱建立及共有峰归属分析。采用高效液相色谱法,建立CXWS指纹图谱,并明确其共有峰归属。结果表明:CXWS指纹图谱,共标定22个共有峰,10批次CXWS相似度在0.985~0.996之间,色谱行为良好,通过与对照品、提取物以及阴性样品的对照分析,确认8、16、18、19、20、21号峰来源于柴胡提取物,5、6、12号峰来源于白芍提取物,11、12号峰来源于延胡索提取物,1、2、4、7、10、13、14、15、17号峰来源于甘草提取物,3号峰来源于柴胡和白芍提取物,9号峰来源于柴胡和甘草提取物。以上研究结果表明,本研究建立的指纹图谱特征性强、相似度良好,CXWS化学成分,完善了CXWS质量控制体系。
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