蝇蛆抗菌肽的诱导及对鸡白痢治疗效果研究

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抗菌肽是先天性免疫重要的效应分子,通过广谱的抗菌活性,帮助机体对抗病原微生物的入侵。家蝇幼虫(蝇蛆)体内含有抗菌肽,帮助其在充满致病菌的环境中生存。本研究中,利用灭活沙门氏菌诱导蝇蛆和白痢鸡粪培养蝇蛆产生抗菌肽,并粗提抗菌肽,测定其浓度及抑菌活力,然后再用蝇蛆抗菌肽粗提液,治疗人工感染鸡白痢疾沙门氏菌的雏鸡。试验结果显示,经沙门氏菌诱导能显著增加蝇蛆抗菌肽的表达水平,灭活沙门氏菌和沙门氏菌分别诱导蝇蛆产生的抗菌肽浓度显著高于未诱导的蝇蛆(P<0.05),抑菌圈直径也显著高于未诱导蝇蛆组(P<0.05),沙门氏菌诱导蝇蛆组的抗菌肽抑制沙门氏菌的最小抑菌浓度为0.5mg/mL,低于葡萄球菌(1.5mg/mL)和大肠杆菌(2mg/mL)。各蝇蛆抗菌肽组对耐药性沙门氏菌的抑菌直径均高于抗生素组(P<0.05)。SDS-PAGE试验结果显示:与对照组(未诱导组)相比,诱导蝇蛆抗菌肽组多了一条分子量为7KD的抗菌肽条带。浓度为3.0×107CFU/mL的大肠杆菌作用24h的蝇蛆组产生的抗菌肽浓度最高、活性最强,且蝇蛆体内细菌含量为1.6×105CFU/g,低于国家规定的饲料细菌标准含量最低值2×106CFU/g。白痢鸡粪培养的蝇蛆抗菌肽浓度与抑菌活性均显著高于健康组(P<0.05),对大肠杆菌、沙门氏菌和葡萄球菌都有抑制作用。蝇蛆抗菌肽治疗白痢艾维茵肉雏鸡的结果显示,未诱导的蝇蛆抗菌肽组的治愈率(28.33%±2.89%)与用沙门氏菌诱导蝇蛆的抗菌肽组(33.33%±2.89%)间差异不显著(P>0.05),二者均高于对照组(未治疗组)的治愈率(16.67%±2.89%)(P<0.05),但低于抗生素组(48.33%±2.89%)的治愈率(P<0.05);治疗过程中,对照组(未治疗组)白痢鸡的肠道细菌含量持续在较高的水平,而治疗组白痢鸡的细菌数量呈明显下降趋势,与对照组中白痢鸡体内的细菌数量间差异显著(P<0.05)。对照组白痢鸡体内的白细胞、红细胞数量也持续在较高的水平,整个治疗过程中变化不大,处于异常状态,维持在120×109/L,高于其他各治疗组(抗菌肽、抗生素)(P<0.05);用抗生素治疗的白痢鸡体内白细胞、红细胞的数量低于其他各试验组(P<0.05),且呈现较为明显的下降趋势,蝇蛆抗菌肽治疗组的白痢鸡的白细胞、红细胞的数量同样呈现下降趋势,最后趋于正常数值。说明蝇蛆抗菌肽对沙门氏菌感染引起的白痢病鸡具有治疗作用。综上所述,蝇蛆抗菌肽具有替代抗生素作为绿色抗菌药物的前景,本研究对缓解抗生素在养禽业中的滥用造成的不良影响,改善生态环境和绿色食品安全提供一种新的途径。
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