H5N1亚型禽流感病毒对鸽子和鹌鹑的致病性研究及禽流感疫苗对鹌鹑的免疫效果评估

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H5亚型禽流感病毒(AIV)引起的高致病性禽流感(HPAI)给养禽业造成严重危害,同时也威胁着人类生命健康,但鸽子对H5亚型AIV的易感性及其在AIV传播中所起的作用一直存在争议。鹌鹑被认为是AIV的易感动物,同时有可能是AI传播人体的中间宿主,其在AI传播过程中起着重要作用。研究H5亚型AIV对鸽子和鹌鹑的致病性及传播能力对防控AI具有重要意义,同时针对易感动物选取合适疫苗并制定免疫程序至关重要。为研究H5N1亚型AIV对鸽子的致病性及其接触传播能力,本研究选择2009~2012年分离的3株Clade2.3.2病毒株DK/GD/1322/10、DK/GZ/4102/10、GCG/QH/1/09和1株Clade7.2病毒株CK/NX/2/12分别人工感染鸽子,并于感染24h后放入鸽子和SPF鸡作同居对照。结果显示,4株病毒感染组鸽子均未出现死亡,其中,3株Clade2.3.2病毒感染鸽子均引起较低的发病率,Clade7.2病毒感染鸽子未发病;4株病毒感染组均有少数鸽子出现少量排毒现象;感染组发病的鸽子出现不同程度的病理组织学变化,且病毒在多种脏器中不同程度复制;感染后第14d和21d,DK/GZ/4102/10和GCG/QH/1/09感染组均有2/6鸽子抗体转阳。同居对照的鸽子和SPF鸡均未发病死亡、未排毒,血清抗体未转阳。提示4株H5N1亚型AIV对鸽子具有低致病性,对同居鸽子和SPF鸡均不具有接触传播能力,而且毒株间存在致病性的差异。为研究H5N1亚型AIV对鹌鹑的致病性及其接触传播能力,本研究选择上述4株H5N1亚型AIV人工感染4周龄鹌鹑,并于感染后24h放入同居鹌鹑,检测其发病死亡、排毒、脏器病毒复制、血清抗体转阳情况及其病理组织学变化。结果显示,4株病毒株感染鹌鹑均100%的发病和死亡,鹌鹑全部死亡时间分别依次为36h、48h、72h和96h,病毒在体内各脏器均有复制,出现明显的病理组织学变化,均能通过喉头和泄殖腔排毒;DK/GD/1322/10、DK/GZ/4102/10和GCG/QH/1/093株病毒同居感染组鹌鹑分别在144h、96h、72h内全部发病死亡,而CK/NX/2/12毒株同居组鹌鹑全部存活,但血清抗体2/5转阳。以上结果表明,3株Clade2.3.2病毒和1株Clade7.2病毒对鹌鹑均具有高度致死性,但接触传播能力有一定差异。鉴于H5N1亚型AIV对鹌鹑具有高度致死性和很强传播能力,对鹌鹑采取有效免疫措施来预防AI尤为必要。本研究选取3种禽流感疫苗免疫鹌鹑,从血清抗体监测、淋巴细胞增殖指数测定、血清中细胞因子含量检测、攻毒保护情况等方面评估不同禽流感疫苗对鹌鹑的免疫效果。结果显示,禽流感(H5N1, Re-6+Re-4)和新城疫二联三价灭活疫苗免疫鹌鹑能产生较高滴度抗体,对病毒攻击能提供完全抗死亡保护,但细胞免疫反应相对较弱;新禽二联活苗和禽流感鸭瘟病毒活载体疫苗均能引起鹌鹑产生体液免疫和细胞免疫反应,但对强毒攻击均不能提供完全抗死亡保护,且后者HI抗体极显著高于前者(p<0.01)。疫苗免疫鹌鹑和SPF鸡抗体相比较,前者的HI抗体显著低于后者(p<0.05),表明疫苗免疫抗体与禽品种和疫苗种类均有关。建议用禽流感相关灭活疫苗与新禽二联活苗等活苗配合使用,使机体同时获得体液免疫和细胞免疫,有效预防鹌鹑AI。通过H5N1亚型不同分支AIV对鸽子和鹌鹑的致病性及接触传播能力研究,可为制定防控措施提供参考。通过不同疫苗及不同免疫程序对鹌鹑的免疫效果评估,为合理使用疫苗提供了依据。
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