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背景:硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)是调节脂肪酸不饱和度的关键酶。肿瘤细胞中,SCD1可作为维持增殖和存活的中心调节器。很多研究证实,SCD1抑制在肿瘤细胞中具有普遍的抗增殖作用,如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、胃癌及肠癌等。现有的研究普遍认为,SCD1主要通过调节SFA/MUFA比值影响肿瘤增殖,而我们的最新研究显示,SCD1抑制通过促进神经酰胺从头合成从而使肠癌细胞发生凋亡。在前期研究的基础上,本课题将进一步探究SCD1抑制与神经酰胺从头合成之间的调控关系。课题从RNAseq检测入手,发现SCD1抑制后,肠癌细胞中差异基因最大程度地富集在NF-κB信号通路上,提示我们SCD1抑制的作用靶点与NF-κB密切相关。因此,我们提出假说:SCD1抑制通过NF-κB信号通路影响神经酰胺的从头合成,从而导致肿瘤细胞凋亡。方法:采用人结肠癌和卵巢癌细胞作为工具细胞,应用RNA seq对SCD1抑制剂给药前后的细胞进行测序,并分析差异基因表达。分别应用SCD1基因敲低和小分子抑制剂进行调控,HPLC/MS2检测细胞内神经酰胺和游离脂肪酸的含量变化,CCK8、Real-time PCR、Western Blot等分子生物学实验技术初步探讨其变化机制。结果:本研究从多方面证明了 SCD1抑制可以导致NF-κB激活,从而引起神经酰胺从头合成增加。分别如下:首先,通过RNAseq对给予小分子抑制剂A939前后的肠癌细胞中差异基因富集情况系统分析,发现NF-κB信号通路的变化最为显著;第二,分别用抑制剂A939和siRNA干扰两种方法对肠癌细胞SCD1进行调控,发现SCD1抑制后NF-κB信号通路被显著激活;第三,给予A939后,肠癌细胞中NF-κB下游的炎症因子IL-8、IL-1β、TNF-α表达显著增加;第四,外源性给予NF-κB抑制剂PDTC,发现其可以逆转SCD1抑制引起的肠癌细胞增殖抑制和神经酰胺从头合成;第五,基于OA具有抑制NF-κB激活的作用,在肠癌细胞中外源性加入OA,发现其可以逆转NF-κB p65的磷酸化,神经酰胺从头合成以及细胞增殖抑制;最后,选取对SCD1耐药的细胞株SKOV3进行对比,发现在耐药细胞株中,SCD1抑制不能通过激活NF-κκB而导致神经酰胺含量增加,因此无法起到抗肿瘤作用,反方向证明本文的假设。结论:在肿瘤细胞中,SCD1抑制通过激活NF-κB信号通路,引起神经酰胺从头合成增加,从而起到抗肿瘤作用。