NOS在脑缺血再灌注大鼠肺、肝、肾组织中的变化及罗通定的干预作用

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目的:通过检测大鼠脑缺血再灌注不同阶段,肺、肝、肾组织内不同类型一氧化氮合酶(NOS)的活性变化规律以及药物罗通定干预后的作用,揭示一氧化氮合酶在脑缺血再灌注后肺、肝、肾组织损伤中的作用,并探讨罗通定的保护作用机制。方法:用改良的Pulsinelli四血管阻断的方法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,实验分为三组:假手术组(S组)、脑缺血再灌注组( IR组)和罗通定治疗组(T组)。后两组按再灌注的时间不同,又分为2h、6h、12h、24h和48h五个亚组。T组于夹闭后立即给予罗通定注射液(20mg/kg)腹腔内注射,后每间隔6h给予上述等量药物治疗。各组动物于相应时间点(S组术后即刻,IR及T组分别于再灌注2h、6h、12h、24h、48h),快速处死大鼠,采集标本,测定一氧化氮合酶(NOS)活性,制作并观察病理切片。结果:(1)与假手术组(S组)比较,缺血再灌注组( IR组)总一氧化氮合酶(NOS)活性在2h、12h、24h均比S组高,差别具有统计学意义(P〈0.05)。其中在2h时形成第一次高峰(P<0.05),主要以结构型一氧化氮合酶(eNOS)上升为主(P<0.05),6h时回降至假手术组水平(P>0.05),晚期(>6h),总一氧化氮合酶(NOS)活性再次上升,12h时上升最显著(P<0.01),达第二次高峰,此时以诱导型一氧化氮合酶(iNOS)上升为主(P〈0.01),在24h时仍高(P〈0.05),48h时基本接近S组水平(P > 0.05);(2)与缺血再灌注组(IR组)相比,治疗组(T组)结构型一氧化氮合酶(eNOS)活性在2h时进一步升高(P〈0.01),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性在12h、24h时则明显下降(P〈0.01);(3)假手术组(S组)肺、肝、肾组织病理结构未见异常;IR组病理改变和器官功能(Cr,ALT)与S组比较,均出现不同程度的损害,在12h时表现最严重;T组组织病理和器官功能损伤轻微,较IR组有明显改善。结论:(1)一氧化氮合酶(NOS)参与了脑缺血再灌注后的肺、肝、肾多器官损伤过程。不同类型的一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血再灌注不同阶段的肺、肝、肾组织中的活性不同,发挥着不同的作用:eNOS活性高低与组织损伤程度成反比,活性高时,组织损伤较轻;相反,iNOS活性高低与组织损伤程度成正比,活性高时,损伤最严重。(2)罗通定可以通过调节不同类型一氧化氮合酶(NOS)活性,即早期上调保护作用因子eNOS活性,后期抑制损害作用因子iNOS活性,对急性脑缺血再灌注损伤后大鼠的肺、肝、肾组织起着保护作用。
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