人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin, hCG)是人类受孕后胎盘合体滋养层细胞分泌的一种糖蛋白激素。在妊娠早期hCG的浓度迅速增高,检测尿中的hCG即可证实妊娠。有许多研究表明,在肿瘤病人的血和尿中有游离的hCG的β亚基存在。因此,研制高纯度的hCG单克隆抗体对早孕、癌症的检测有重要的意义。本研究利用经典的淋巴细胞融合技术,制备了人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体,并采用不同方法进行纯化,通过比较和优化,建立了良好的纯化hCG单克隆抗体方法,为临床的快速诊断奠定基础,并为其他单克隆抗体的纯化提供了一定的参考价值。主要实验结果如下:1.得到两株能稳定分泌hCG单克隆抗体的杂交瘤细胞株,细胞培养上清液中抗体效价达10 3以上,腹水抗体效价达10 7以上。2.弗氏不完全佐剂预处理的小鼠比石蜡预处理的小鼠腹水产量高;10～12周龄小鼠腹水产量高于6～8周龄小鼠;雄性小鼠腹水产量高于雌性小鼠。3.腹水经辛酸—硫酸铵沉淀法纯化后,抗体纯度大于80%,抗体回收率达40%,纯化后抗体的生物学活性没有下降。4.腹水以磷酸缓冲液(pH7.0,20 mmol/L PB + 3 mol/L NaCl)上样于HiTrap rProtein A FF预装亲和层析柱,pH3.0,0.1 mol/L柠檬酸缓冲液一步洗脱,回收抗体的纯度大于98%,抗体回收率达75%,纯化后抗体的生物学活性没有下降。