E2F1、β-连环蛋白以及细胞周期因子D1在大肠癌中的表达及其意义

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目的:检测核转录因子E2F-1、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期因子D1(cyclinD1)在大肠癌组织中的表达情况。探讨E2F-1、β-catenin、cyclinD1在大肠癌组织中的表达与临床病理参数的关系,分析这三种蛋白表达与大肠癌生物学行为的关系。   方法:   1.选择河北工程大学附属医院2007年至2009年78例临床资料齐备的大肠癌术后切除标本、20例正常大肠粘膜组织以及30例大肠腺瘤,所有病例术前均未接受放疗、化疗及免疫治疗。   2.免疫组织化学染色采用S-P方法,对比研究E2F-1、β-catenin、cyclinD1的表达情况,结合临床病理资料进行统计学分析。每一组均设阳性和阴性对照组;78例大肠癌患者按年龄、肿瘤大小、病理分级、临床病理分期以及有无淋巴结转移进行分组,分别检测E2F-1、β-catenin、cyclinD1的表达情况。   3.统计学处理:检测数据输入SPSS16.0统计软件进行统计学处理,各组间比较用x2检验、应用非参数统计中Spearman等级相关对E2F-1、β-catenin和cyclinD1在大肠癌中的表达相互间关系进行分析。检验标准α=0.05,P<0.05为差异具有统计学意义。   结果:   1.E2F-1蛋白在不同病例中的表达情况:免疫组化结果显示,E2F-1蛋白阳性反应定位于细胞核,在正常大肠粘膜、大肠腺瘤以及大肠癌中E2F-1蛋白阳性表达率分别为0、6.67%和61.54%。比较发现大肠癌组织中E2F-1蛋白的阳性表达与病理分级、临床病理分期以及淋巴结转移有关,而与年龄、肿瘤大小无关。   对不同病例进行病理分级,分析发现高分化大肠癌组织中E2F-1阳性表达率为29.17%,中分化大肠癌组织中E2F-1阳性表达率为62.50%,低分化大肠癌组织中E2F-1阳性表达率为86.87%;比较E2F-1在三组患者中的阳性表达率具有统计学意义(P<0.05)。进行临床病理分期分析发现,Dukes分期中A+B的患者E2F-1阳性表达率48.65%,C+D期E2F-1阳性表达率73.17%,比较E2F-1在两组患者的阳性表达,有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移的患者中E2F-1阳性表达率为74.42%,无淋巴结转移的患者中E2F-1阳性表达率为31.43%;比较E2F-1在两组患者的阳性表达,具有统计学意义(P<0.05)。   2.β-catenin蛋白在不同病例中的表达情况:免疫组化结果显示,正常大肠组织中β-catenin蛋白阳性反应定位于细胞膜,大肠腺瘤和大肠癌中3-catenin蛋白阳性反应定位于细胞浆和细胞核,为异位表达。在正常大肠组织、大肠腺瘤及大肠癌组织中β-catenin蛋白膜阳性表达率分别为90.00%、43.33%和6.41%。在正常大肠组织、大肠腺瘤及大肠癌组织中β-catenin蛋白异常表达分别为5.00%、36.67%和92.31%。β-catenin的异位阳性表达与病理分级、临床病理分期以及淋巴结转移有关,与年龄、肿瘤大小无关。   对不同病例进行病理分级,分析发现高分化大肠癌组织中β-catenin异位阳性表达率为16.67%,中分化大肠癌组织中β-catenin异位阳性表达率为45.83%,低分化大肠癌组织中β-catenin异位阳性表达率为83.33%;比较β-catenin在三组患者中的异位阳性表达率具有统计学意义(P<0.05)。进行临床病理分期分析发现,Dukes分期中A+B的患者β-catenin异位阳性表达率45.95%,C+D期β-catenin异位阳性表达率70.73%,比较β-catenin在两组患者的异位阳性表达,有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移的患者中β-catenin异位阳性表达率为69.77%,无淋巴结转移的患者中β-catenin异位阳性表达率为45.71%;比较β-catenin在两组患者的异位阳性表达,具有统计学意义(P<0.05)。   3.CyclinD1蛋白在不同病例中的表达情况:免疫组化结果显示,CyclinD1蛋白阳性反应定位于细胞核,在正常大肠组织、大肠腺瘤及大肠癌组织中CyclinD1蛋白阳性表达率分别为0、13.33%和55.13%。cyclinD1的阳性表达与与病理分级、临床病理分期以及淋巴结转移有关,与年龄、肿瘤大小无关。   对不同病例进行病理分级,分析发现高分化大肠癌组织中CyclinD1阳性表达率为25.00%,中分化大肠癌组织中CyclinD1阳性表达率为54.17%,低分化大肠癌组织中CyclinD1阳性表达率为80.00%;比较CyclinD1在三组患者中的阳性表达率有统计学意义(P<0.05)。进行临床病理分期分析发现,Dukes分期中A+B的患者CyclinD1阳性表达率35.14%,C+D期CyclinD1阳性表达率73.17%,比较CyclinD1在两组患者的阳性表达,有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移的患者中CyclinD1阳性表达率为74.42%,无淋巴结转移的患者中CyclinD1阳性表达率为31.43%;比较CyclinD1在两组患者的阳性表达,具有统计学意义(P<0.05)。   4.E2F-1、β-catenin和CyclinD1蛋白在大肠癌中表达的相互关系:Spearman等级相关分析表明,在大肠癌组织中E2F-1与CyclinD1蛋白两者表达呈正相关关系(等级相关系数r=0.611,P<0.01);β-catenin与CyclinD1呈正相关关系(等级相关系数r=0.558,P<0.01);未发现E2F-1与β-catenin有明显相关性(等级相关系数r=0.124,P>0.05)。   结论:   1.正常大肠组织中E2F-1和cyclinD1没有表达,大肠癌中E2F-1和cyclinD1表达明显升高。并且E2F-1和cyclinD1阳性表达与大肠癌的病理分级、临床病理分期以及淋巴道转移有关,说明E2F-1和cyclinD1作为癌基因,对大肠癌的发生、发展起促进作用。   2.β-catenin在大肠癌中膜表达消失,在癌细胞中胞浆/胞核内出现异位表达,并且与大肠癌的组织分级、临床分期和淋巴结转移有关,说明β-catenin表达异常对大肠癌浸润深度、淋巴结转移及远处转移起一定作用。   3.E2F-1与cyclinD1之间呈正相关关系,β-catenin与cyclinD1也呈正相关关系。E2F-1与β-catenin没有明显相关性,但我们推测两者在大肠癌细胞中可能存在着RB/E2Fs通路与Wnt/β-catenin通路的交互作用。
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