粘细菌抗肿瘤活性物质筛选及对荷瘤小鼠抑瘤活性和机制研究

来源 :河北大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:ggfjkjtyr
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文对河北省微生物多样性研究与应用实验室保藏的100株粘细菌的发酵产物进行了体外细胞毒筛选,100个发酵液样品中对人乳腺癌细胞MCF-7有抑制作用的达到82%,说明粘细菌次级代谢产物对肿瘤细胞具有普遍的细胞毒作用。一个好的抗肿瘤药物不仅需要对肿瘤细胞有强大的杀伤作用,而且需对人正常细胞有很小的损害,通过对正常二倍体人胚肺成纤维细胞存活率的测定,选取2#、15#、24#、37#、66#、87#等6株粘细菌的发酵产物,通过利用人子宫颈癌HeLa细胞和人肺腺癌A549进行复筛,结果显示15#菌株发酵产物对A549和HeLa抑制作用较强,72h的IC50分别为6.66μg/mL和14.70μg/mL,且其抑制作用具有较好的时效关系,对人正常二倍体MRC细胞毒性较小,其实验重复性好,初筛和复筛结果相互印证,有开发成为抗肿瘤药物的潜能,选择进行下一步组分分析。选择甲醇和乙腈作为流动相分别对15#菌株发酵代谢产物进行梯度洗脱,通过比较可知乙腈对代谢产物的洗脱能力较强,确定15#菌株发酵代谢产物的最适分离条件为乙腈:水=49:51(体积比),检测波长为350nm,15#菌株发酵产物分离得到了5个组分,对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制实验结果表明:15-1组分具有很好的量效对应关系,当终浓度为100μg/mL时,15-1对人乳腺癌细胞的抑制率分别为71.73%,其它组分的抑制效果则不明显,说明15-1组分抑制肿瘤细胞生长的活性是较强的。菌株91018是本实验室已筛选出来的具有抗肿瘤活性的菌株,根据已摸索好的液相分离条件,制备菌株91018发酵产物单组分91018-1,当终浓度为100μg/mL时,对人子宫颈癌细胞和人乳腺癌细胞的抑制率分别为69.19%和22.59%。荷瘤小鼠抑瘤实验显示91018-1单组分1.25mg/kg剂量组对于小鼠肝癌H22肿瘤细胞的抑瘤率最高,达到48.7%,剂量过大或过小都不利于抑瘤效果。阳性对照环磷酰胺的抑瘤率达到81.3%,但小鼠体征不好。第8天阳性对照组小鼠有一只死亡,说明环磷酰胺的毒性较大,严重影响了小鼠的健康,而1.25mg/kg剂量组小鼠活动自如,皮毛光滑,食量较正常,体重有明显增加。说明1.25mg/kg剂量的91018-1组分对小鼠肝癌H22肿瘤生长有一定的抑制作用,并且对小鼠的毒性较少。流式细胞仪检测发现1.25mg/Kg实验组细胞凋亡率比阴性对照组明显提高,PI细胞增殖指数样品1.25mg/Kg实验组与阴性对照组存在显著差异,说明1.25mg/Kg实验组S和G2/M期的细胞减少,细胞被阻止在G0/G1期,从而影响DNA的合成。1.25mg/Kg样品组与阴性对照组的p53蛋白表达量存在显著差异,说明凋亡通过p53正调控产生,阻止了DNA合成。Bcl-2蛋白表达量与阴性对照相比不存在显著差异,凋亡不是通过Bcl-2蛋白诱导产生。综合利用质谱(GCT-MS、ESI)、氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)、二维谱图(DEPT)等现代波谱技术,对91018-1组分进行结构分析。经解析得知该化合物中文名称为粘噻唑。
其他文献
歌剧是包含音乐、文学、戏剧、舞蹈、美术等多种元素的一种综合性艺术形式。它诞生于欧洲,引进我国也仅有近百年的历史。但我国歌剧的发展既是中西方音乐文化、美学思想的交
以“加强学术引领,推动传承创新”为主题的“第四届岐黄论坛”日前在京召开。该论坛立足传统、面向前沿,汇聚多领域、多学科专家学者,以期引领中医药学术进步,推动中医药创新与发
报纸
目的:总结躯体形式障碍临床特点,提高诊断率。方法:对50例躯体形式障碍患者的住院资料进行分析,所有患者均符合CCMD-3躯体形式障碍诊断标准。结果:躯体形式障碍首诊常去综合医院
互联网技术的高速发展为交互式平台的出现创造了得天独厚的条件,在线社区以其便利、低成本、开放等特征吸引了诸多用户参与其中,不仅为消费者提供了信息交流与情感互动的平台,也为企业吸引新客户、提升品牌影响力提供了新思路。在线产品社区作为一种全新的用户-企业互动形式,已在营销领域得到了广泛运用,为企业带来了巨大的社会影响和经济效益。近年来,有关在线社区的研究主要集中于社区发展演化的理论性综述、用户参与以及用
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
目的:放射治疗的一个基本理论依据是肿瘤细胞和正常组织具有生物学差异,对放疗反应不同,即肿瘤组织对放疗更敏感,这也是放射治疗的基础。CDC25A的过表达常见于多种肿瘤组织中,
随着国内高校的发展,科研成为与教学同等重要的工作。高校对科研的重视程度越来越强,对科研的绩效考核变得重要,每个高校的科研绩效考核指标不尽相同,但大多数高校科研绩效考
【正】 一、股票价格的形成机制在证券市场,价格机制是最重要的机制,股票的价值是公司所有权大小的反映。股票具有双重商品属性,既具有"正常商品"属性又具有"稀缺商品"的属性