目的:肝细胞肝癌(HCC)是一种高耐药性的原发性肝癌。研究发现二萜类化合物可以抑制信号通路相关蛋白的表达和活性,诱导细胞凋亡,从而发挥抗肝癌作用。本课题研究一种二萜类化合物GHO2的抗肝细胞肝癌效果,并探究其作用机制。方法:(1)采用CCK-8细胞增殖实验研究化合物GHO2体外抑制不同肝细胞作用;(2)倒置荧光显微镜、流式细胞仪和Western blotting实验分别从形态学、定量和蛋白表达水平分析其诱导细胞凋亡作用;(3)建立HepG2细胞肝癌裸鼠移植瘤模型和Hepal-6细胞肝癌原位模型,并观察GHO2体内抑制肝细胞肝癌作用;(4)利用蛋白组学方法观察GH02处理后HepG2细胞内蛋白表达的变化;(5)JC-1染色后倒置荧光显微镜观察线粒体膜变化;(6)Western blotinng实验检测细胞凋亡和信号通路蛋白表达的变化。结果:(1)GHO2可以体外显著抑制HCC细胞系HepG2,Hep3B和SK-HEP-1细胞增殖能力,其作用48 h的半数致死率(IC50)分别为:9.315±1.92 μmol/L、7.107±0.61 μmol/L 和 5.93±0.89 μmol/L,对人正常肝细胞 QSG7701 和 L02 的 IC50分别为 33.5±3.34μmol/L 和 31.04±3.79 μmol/L;(2)GH02 能够阻滞 G1 期细胞周期,诱导细胞凋亡,上调caspase-9剪切条带,但是对caspase-3没有影响;(3)体内实验中,GH02可以抑制HepG2细胞裸鼠移植瘤模型和Hepal-6细胞小鼠原位移植瘤模型肿瘤的生长;(4)蛋白组学结果表明化合物GH02作用HepG2细胞24 h后影响凋亡蛋白caspase-7和CTSL蛋白表达,调控多种周期蛋白(CDKN2A,ANAPC5,CDK7和ORC6)阻滞细胞周期于G1/S期,并且影响多条信号通路相关蛋白的表达;(5)GH02可以破坏线粒体膜通透性,下调Bcl-2,Mcl-1和Cyclin D蛋白表达,抑制磷酸化Src和磷酸化STAT3蛋白表达,诱导细胞凋亡从而抑制HCC细胞增殖。结论:化合物GH02可以通过抑制Bcl-2和Mcl-1蛋白的表达以及Src/STAT3信号通路,从而在体内和体外发挥抗肝细胞癌作用。因此,GH02可以作为针对HCC抗肿瘤药物的潜在先导化合物。