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结核病(Tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)而引起,其中“Beijing”型菌株具有较强的传播能力和耐药性。“Beijing”型菌株包括HN878, W4和W451,此型菌株的细胞壁外层都普遍含有酚糖脂(phenolic glycolipid,PGL)。PGL-tb1在“Beijing”型株结核分枝杆菌感染过程中发挥重要作用。因此,PGL-tb1寡糖可以作为研发结核病疫苗的良好抗原。本文通过高效、大量的合成PGL-tb1寡三糖,然后将其与CRM197载体蛋白偶联得到新型PGL-tb1寡糖-蛋白缀合物,并对PGL-tb1寡糖-蛋白缀合物进行表征和免疫原性方面的考察。首先,以L-鼠李糖为原料,通过9步保护和脱保护的反应以35%的收率获得对碘苯基2-O-甲基-4-0-苄基-α-L-吡喃鼠李糖糖砌块,以L-鼠李糖为原料,通过8步基本操作以38%的收率得到对甲苯基2-O-苯甲酰基-3-O-烯丙基-4-0-苄基-1-硫代-α-L-吡喃鼠李糖糖砌块,以L-岩藻糖为原料以及以57%收率的7步反应获得对甲苯基2-0-甲基-3,4-二-O-乙酰基-1-硫代-β-L-岩藻糖糖砌块,之后,采用[1+1+1]的糖苷化策略,选择合适的保护基和反应条件,以36%收率立体专一得到a( 1 →3 )糖苷键构型的PGL-tb1三糖。通过Sonogashira偶联反应,在三糖还原端引入Linker,通过一步催化氢化反应同时完成三糖上保护基脱除、炔基还原和叠氮还原。应用方酸化学通过简单有效地方式将寡糖与CRM197结合,成功制备出PGL-tb1寡糖-蛋白缀合物。通过SDS-PAGE分析,结果显示寡糖与蛋白有效结合,利用MALDI-TOF MS定量测定缀合物分子量,得到寡糖与CRM197结合比为3.0:1,结合效率为18%;寡糖与BSA结合比为13.2: 1,结合效率73%。下一步是对PGL-CRM197缀合物进行免疫原性评价,在无佐剂的条件下,选用不同剂量的PG-CRM197缀合物免疫小鼠,在2μg中剂量下,二免后产生针对PGL半抗原的中值为～197 000 IgG的抗体滴度,而三免后抗体滴度进一步增加至～430 000。此外,在5 μg高剂量三免后,在小鼠血清中观察到抗体滴度超过80万,这表明PG-CRM197具有制备结核疫苗的可能性。