论文部分内容阅读
黄芪是传统补气药,临床上常使用生品和蜜炙品。生品黄芪主要用于益卫固表,利水消肿,托毒生肌,蜜炙可加强补中益气的作用。目前,人们对蜜炙黄芪和黄芪的研究多在体外一种或几种成分的含量变化上,其临床疗效差异的药效物质基础并没有被阐述;口服药物入血成分才可能成为起效物质,而药物起效也可能是代谢物作用结果,研究药物在体内的吸收代谢更有利于寻找其药效物质。本课题通过研究黄芪蜜炙前后在大鼠体内的代谢谱及差异,为探寻其临床疗效差异的物质基础提供实验依据。首先采用菲罗门kinetex柱对蜜炙黄芪和黄芪水提物体外成分进行表征,共鉴定了包含16个黄酮类和15个皂苷类化合物在内共39个成分,方法学考察结果表明方法可靠稳定,可用于进一步的实验研究。然后利用UPLC/Q-TOF-MS结合多元统计分析方法(OPLS-DA)对大鼠口服蜜炙黄芪和黄芪水提液后的血清和尿液进行成分分析,共找出66个药物代谢物和9个药物原型;代谢物分析结果表明药物在大鼠体内主要发生去糖基化、甲基化、去甲基化、羟基化、去羟基化、葡萄糖醛酸化、硫酸化和水解反应;9个体内移行成分包括毛蕊异黄酮苷(calycosin-7-O-β-D-glucoside)、芒柄花苷(ononin)、毛蕊异黄酮(calycosin)、芒柄花素(formononetin)、黄芪甲苷(astragaloside I V)、黄芪皂苷II(astragaloside II)、3-羟基-9,10-二甲氧基紫檀烷((6aR,11aR)-3-Hydroxy-9,10-dimethoxypterocarpan)、7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷苷(7,2’-Dihydroxy-3’,4’-dimethoxyisoflavan-7-O-β-D-glucoside)和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷(7,2’-Dihydroxy-3’,4’-dimethoxyisoflavan)。应用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法(OP LS-DA)分析方法对给药黄芪蜜炙前后水提物1h后大鼠的血清和24h内的尿液分别进行对比分析,分别找出了17和20个差异代谢物。此外,本课题还利用UPLC/Q-TOF-MS技术测定了血清中主要成分的含量,测定结果表明毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷的吸收炙品组明显高于生品组,从而说明半定量结果是可靠的。以上结果表明,大鼠口服蜜炙黄芪和黄芪水提物后,在体内的吸收代谢存在明显差异,其中药物原型毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷和芒柄花素是吸收代谢差异大的成分,推测其与黄芪蜜炙前后临床疗效的差异相关;本课题对黄芪蜜炙前后水提物在大鼠体内的代谢谱研究也为探寻蜜炙黄芪的药效物质提供了重要实验基础。