ADRP、PKC在动脉硬化斑块的表达及与稳定性关系的研究

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研究目的:通过比较人离体腘动脉粥样硬化斑块中稳定斑块与不稳定斑块内脂肪分化相关蛋白(ADRP)、蛋白激酶C(PKC)、CD36的表达情况的差异,探讨这些因子与斑块稳定性的关系及在不稳定斑块形成中的作用机制。研究方法:取动脉硬化闭塞症行手术治疗患者的腘动脉18份为动脉硬化组,于斑块中心处把标本纵向剖开截为两份,一份用10%甲醛溶液固定,行HE染色及免疫组化分析;另一份冻存于-80℃冰箱中用于PCR方法检测。取无动脉硬化病史及危险因素行肠道手术患者肠系膜动脉10例为正常对照组,标本同样截为两份分别行甲醛固定及-80℃冰箱冻存。甲醛固定标本先行HE染色及免疫组化分析。根据HE染色结果把动脉硬化组分为稳定斑块组及不稳定斑块组两个亚组。应用免疫组化方法检测ADRP、PKC及CD36在正常对照组、稳定斑块组、不稳定斑块组中的表达,应用统计学方法检验各组中这三种物质表达量是否不同。再于冻存标本中每组随机抽取相同数量样本按正常对照组、稳定斑块组、不稳定斑块组分别行RT-PCR检测ADRPmRNA表达,并通过计算机图像分析系统进行分析,应用统计学方法检验各组标本中ADRPmRNA表达量是否不同。研究结果:1.HE病理染色显示:正常对照组血管壁内膜光滑,管腔侧内皮细胞排列整齐,核蓝染,中膜平滑肌细胞核呈梭形,末见增生。实验组血管壁破坏严重,均有典型的粥样斑块形成,内膜增厚、纤维化,血管内膜向管腔突出,斑块内可见大量泡沫细胞浸润及脂质沉积,内膜可见炎性细胞和增生的平滑肌细胞,中膜平滑肌细胞明显增生、紊乱。不稳定斑块可见大的脂质核心、炎细胞浸润及胆固醇结晶。2.免疫组化半定量分析显示: ADRP、PKC及CD36在动脉硬化组斑块中大量表达,不稳定斑块中ADRP、PKC、CD36表达量略高于稳定斑块。3.RT -PCR检测结果:ADRP在动脉硬化斑块中表达增加,不稳定斑块中的ADRP表达高于稳定斑块。结论:1.动脉粥样硬化斑块中的ADRP、PKC及CD36表达上调。2.不稳定性斑块中ADRP、PKC及CD36表达量高于稳定斑块。3、ADRP、PKC及CD36在斑块中高表达与斑块不稳定性相关。
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