ABCE1在肺癌、癌旁组织及转移淋巴结中表达的RT-PCR及免疫组化法检测

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目的肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,肺癌的发病率和死亡率已跃居各类恶性肿瘤的前列,在欧美一些发达国家,肺癌的发病率和死亡率已成为各种癌症之首。肿瘤转移是恶性肿瘤(癌)的重要生物学特征。大多数癌症患者并非死于原发癌,而是死于转移性癌。因此,肿瘤转移的研究是一个令人关注的重要课题。恶性肿瘤的发生是多基因参与并相互作用的多阶段过程,肿瘤的转移同样是多因素多基因相互协调作用的多阶段过程。近年来,随着肿瘤分子生物学技术的进展,人们相继发现了nm23-H1、TIMP5、KAI1、MRP-1等转移抑制基因,另外还发现了一些与肿瘤转移相关的基因,如CD44、c-erb B-2等。ATP结合盒转运子E1 (ATP-binding cassette transporter E1, ABCE1)于多细胞真核生物细胞胞浆内编码一种名为核糖核酸酶L(Ribonuclease L, RNaseL)抑制因子的68KD蛋白,而在细胞内RNase L能特异性结合并降解RNA,因此ABCE1蛋白通过对RNase L的抑制阻断2-5A/RNase L通路,从而间接抑制了细胞的凋亡。目前ABCE1基因及其参与调节的2-5A/RNase L通路在某些恶性肿瘤的发生、进展等方面的作用也得到一些体现。因此我们有推测ABCE1参与肺癌的进展和转移。本实验就是通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术及免疫组化(SP)法检测ABCE1基因在肺癌原发灶、转移淋巴结与癌旁组织之间的表达差异,从而评价其在肺癌进展和转移上的影响,评价其临床意义。方法本实验采集18例临床手术切除的不同肺叶或肺段人肺癌组织、癌旁组织、转移淋巴结标本。标本于术后送大体病理学检查后分割为两部分,一部分立即置液氮内速冻,-80℃贮存,用以RT-PCR方法检测ABCE1基因mRNA表达差异;另一部分立即以10%中性福尔马林浸泡固定,用以免疫组织化学实验。结果RT-PCR实验结果显示:肺癌组织及转移淋巴结中ABCE1基因表达量高于癌旁组织,肺癌组织中ABCE1基因表达量与转移淋巴结中表达差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化实验结果显示:ABCE1蛋白表达主要定位于细胞浆。结论1. ABCE1的蛋白表达定位于细胞浆。2.ABCE1基因在肺癌组织,转移淋巴结呈高表达。3.ABCE1可能与肺癌的发生及转移过程相关。
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