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目的:既往研究显示,糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者早期阶段即存在内皮细胞明显损伤。研究表明,内皮-间充质转分化(endothelial-to-mesenchymal transition,End MT)参与了DN蛋白尿的发生发展。最近研究发现,FK506具有内皮保护作用,且FK506可以明显减轻DN蛋白尿,但其潜在机制不清。本研究从End MT角度,探讨FK506降低DN大鼠蛋白尿的可能机制。方法:选取SD大鼠36只,给予24只大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(58mg/kg)。将造模成功的24只DN大鼠随机分为两组:DN组(N=12)和DN+FK506组(DN+FK506,0.5mg/kg/d,N=12)。设正常对照组(NC,N=12)。于链脲佐菌素注射前及用药4、8、12、16、20、24周末,测24h尿蛋白、体重、空腹血糖、血肌酐和FK506血药谷浓度。24周末处死大鼠,计算肾脏肥大指数(肾质量/体质量)。光镜、电镜观察肾脏病理改变,免疫组化方法检测内皮细胞标记物(CD31)和成纤维细胞标记物(α-SMA)蛋白表达,免疫荧光双染检测CD31和α-SMA的共表达。RT-PCR检测CD31、FSP1和α-SMA的m RNA;WB测定肾组织CD31、FSP1和α-SMA表达。结果:与NC组相比,FK506干预24周后,DN、DN+FK506组大鼠的24h尿蛋白、血肌酐、尿素氮、血糖、肾重/体重均显著增加(P<0.05);与DN组比较,DN+FK506组的24h尿蛋白、血肌酐、尿素氮、肾重/体重水平明显下降(P<0.05),血糖无明显差异(P>0.05)。FK506血药谷浓度为0.5±0.023ng/ml。DN组大鼠病理提示肾小球体积增大、系膜细胞增生、系膜外基质增多等改变;与DN组相比,DN+FK506组肾小球系膜细胞增生减轻,细胞外基质减少。与NC组比较,DN组大鼠肾组织在电镜下表现为内皮细胞细胞肿胀,窗孔排列紊乱;与DN组比较,DN+FK506组大鼠内皮细胞病变程度减轻。免疫荧光双染结果发现,DN组大鼠肾小球中存在CD31和α-SMA的共定位,而FK506干预可改善这一现象。免疫组化结果显示FK506可抑制DN的α-SMA表达,改善CD31表达。RT-PCR和WB结果显示:与NC组比较,DN组CD31表达下降,FSP1,α-SMA表达明显升高;与DN组比较,DN+FK506组CD31表达升高,FSP1,α-SMA表达明显下降(P<0.05)。结论:中等量FK506对DN大鼠具有肾脏保护作用,其机制可能是通过抑制肾小球End MT,从而降低蛋白尿。