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磷是水产动物生长所必需的常量矿物质元素,但水产动物对水体磷的吸收率极低,大部分磷必须从饲料中获得。饲料磷摄入不足会导致水产动物生长性能下降,体脂含量增加、体蛋白含量降低,钙磷沉积低和骨矿化不足等不良影响;而饲料磷摄入过量一方面会增加饲料成本,另一方面,饲料过量且没有被利用的磷会被排入水体中,进而造成养殖水环境的污染。因此,适宜的饲料磷添加水平十分重要。同时,磷的来源、饲料中钙磷比以及动物肠道pH等都会影响磷的吸收利用,这些因素都会影响饲料中磷的合理添加。本试验以中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)为研究对象,探讨了饲料磷水平、磷源、钙磷比及几种有机酸对幼蟹生长、体成分、抗氧化能力和钙磷代谢的影响,结果可为幼蟹的磷营养需求提供科学依据,丰富幼蟹矿物质磷营养的理论资料,也为幼蟹优质饲料的研制提供基础数据。1饲料磷水平对中华绒螯蟹幼蟹生长、体成分、抗氧化能力和脂代谢的影响本试验为研究饲料磷水平对中华绒螯蟹幼蟹生长、体成分、抗氧化能力和脂代谢的影响,制作有效磷水平分别为0.20%、0.44%、0.99%、1.37%、1.75%和2.01%的六种纯化饲料,投喂幼蟹(0.38±0.01 g)56天。结果显示,饲料磷水平显著影响着幼蟹的增重率、特定生长率和蜕壳频率,其中摄食0.99%有效磷饲料的幼蟹的生长性能最好。随着饲料中有效磷水平的上升,幼蟹的全蟹灰分、钙和磷的含量及肝胰腺和血清中的磷含量增加,而全蟹镁含量下降。饲料磷水平的升高导致了全蟹和肝胰腺的粗脂肪含量降低,肝胰腺的粗蛋白含量升高。随着饲料中有效磷水平从0.20%上升到1.37%,血清和肝胰腺中碱性磷酸酶活性随之升高,之后随饲料有效磷水平的继续升高而降低。饲料有效磷水平显著影响着肝胰腺的丙二醛含量、总抗氧化能力以及总超氧化物歧化酶活力。饲料中有效磷水平为1.37%时,幼蟹肝胰腺的抗氧化酶活力最高,丙二醛含量最低。RT-q PCR分析结果表明,饲料磷可能是通过抑制脂肪合成相关基因和促进脂肪转运相关基因来达到降低肝胰腺脂肪积累的效果。本研究表明,1.16%~1.51%的饲料有效磷能促进中华绒螯蟹幼蟹的生长,提高肝胰腺的抗氧化能力,减少肝胰腺的脂肪积累。2饲料钙磷比对中华绒螯蟹幼蟹生长、体成分、抗氧化能力、渗透压调节和钙磷代谢的影响本试验为探究饲料钙磷比对中华绒螯蟹幼蟹生长、体成分、抗氧化能力、渗透压调节和钙磷代谢的影响,以磷酸二氢钠(Na H2PO4·2H2O)为磷源、氯化钙(Ca Cl2)为钙源,配制六种钙水平分别为0.5%(低钙)、1.5%(中钙)和2.5%(高钙),总磷水平分别为1.5%和2.0%的等氮等脂纯化饲料,饲喂初重为4.39±0.01 g的幼蟹56天。试验结果显示,当饲料磷水平为1.5%时,中钙组的幼蟹的增重率、特定生长率及蜕壳频率显著高于低钙组;而当饲料磷水平为2.0%时,中钙组和高钙组的幼蟹的增重率、特定生长率及蜕壳频率显著高于低钙组。当饲料磷水平一致时,与0.5%钙相比,饲料中添加2.5%的钙能显著提高全蟹灰分含量、全蟹和肝胰腺中的钙磷含量及血清磷含量,同时显著降低全蟹的粗脂肪含量。当饲料磷为1.5%或2.0%时,中钙组肠道钙磷吸收相关基因的表达显著高于低钙组。无论饲料磷水平是1.5%还是2.0%,与低钙组相比,中钙组和高钙组有较高的血清渗透压和碱性磷酸酶活力,以及鳃中Na+K+-ATP酶活力及其基因表达。当饲料磷水平相同时,饲料中添加1.5%钙能显著降低肝胰腺中的丙二醛含量,提高总抗氧化能力和总超氧化物歧化酶活力。综合考虑,饲料钙磷比为0.76~1(饲料中实际钙磷水平为1.59/2.10~1.58/1.59)能促进中华绒螯蟹幼蟹的生长,提高钙磷吸收和沉积效率,增强机体渗透压调节能力和抗氧化能力。3有机酸对中华绒螯蟹幼蟹生长、抗氧化能力、非特异性免疫和钙磷代谢的影响本研究旨在探究不同的有机酸,柠檬酸(CA),苹果酸(MA),α-酮戊二酸(AKG),富马酸(FA)和乳酸(LA)对中华绒螯蟹的生长、抗氧化能力、非特异性免疫和钙磷代谢的影响。在基础饲料(对照组C)中分别添加0.2%的CA,MA,AKG,FA和LA制成五种等氮等脂的纯化饲料,饲喂初始体重为3.09±0.01 g的幼蟹56天。试验结果显示,摄食饲料添加FA,AKG和CA的幼蟹的增重率和特定生长率显著高于C组,其中摄食饲料添加AKG的幼蟹的增重率和特定生长率最高。AKG、CA和FA组幼蟹的粗脂肪含量显著低于C组,而全蟹的钙和磷含量则高于C组。同时,与C组相比,CA、AKG和FA组幼蟹肠道组织有着较高的钙磷吸收相关基因表达。添加有机酸组的全蟹粗灰分含量,肝胰腺、肌肉、血清钙和磷含量显著高于C组。CA,AKG和FA组幼蟹肝胰腺的抗氧化酶活力显著高于C组,且丙二醛含量显著低于C组。处理组幼蟹血清和肠道中碱性磷酸酶活力、肠道中酸性磷酸酶活力以及血清中总蛋白质含量显著高于C组。AKG,CA和FA组的肠道和肝胰腺的消化酶(胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶)活性均显著高于C组。本研究表明,饲料中添加CA,AKG和FA可提高中华绒螯蟹幼蟹的生长、抗氧化能力、非特异性免疫力、消化酶活性以及钙和磷的吸收和沉积,未来可考虑将CA、AKG或FA等合理添加到中华绒螯蟹幼蟹饲料中,以促提高幼蟹对饲料中钙磷的利用效率,促进幼蟹的健康和生长。4饲料磷源和柠檬酸对中华绒螯蟹幼蟹生长性能、体成分、抗氧化能力和钙磷代谢的影响本试验旨在探究饲料磷源和柠檬酸对中华绒螯蟹幼蟹生长性能、体成分、抗氧化能力和钙磷代谢的影响。以磷酸氢钙(DCP,Ca HPO4·2H2O)、磷酸二氢钙[MCP,Ca(H2PO4)2·H2O]和磷酸一二钙[MDCP,Ca HPO4·2H2O·Ca(H2PO4)2·H2O]三种物质为磷源,配制两种不同柠檬酸水平(0%和0.2%)制成6种等氮、等脂的纯化饲料。饲喂初始体重为4.11±0.02 g的幼蟹8周。结果表明,各试验组之间幼蟹的生长均不受饲料磷源、柠檬酸水平及二者交互作用的影响。在不添加柠檬酸的情况下,MDCP组的全蟹粗脂肪含量显著低于DCP组。在相同饲料柠檬酸水平下,MCP和MDCP组的全蟹灰分含量、全蟹和肝胰腺钙磷含量及饲料有效磷含量显著高于DCP组。饲料中添加柠檬酸能显著提高MCP和MDCP组全蟹灰分、全蟹和肝胰腺钙磷以及饲料有效磷含量。在同一饲料柠檬酸水平下,MDCP组的血清磷含量和肠道钙磷吸收基因表达显著高于DCP组;同时,饲料中添加柠檬酸能显著提高钙网蛋白的基因表达。在相同饲料柠檬酸水平下,MDCP组幼蟹肝胰腺的总抗氧化能力和总超氧化物歧化酶活力显著高于DCP组,而丙二醛含量显著低于DCP组;饲料中添加柠檬酸能显著提高DCP、MCP和MDCP组肝胰腺的总抗氧化能力和总超氧化物歧化酶活力。本研究表明饲料中添加柠檬酸可提高以MCP和MDCP为饲料磷源的幼蟹的钙磷沉积和抗氧化能力,这提示柠檬酸在幼蟹饲料中有良好的应用前景。另外,两种磷源饲料在抗氧能力和钙磷沉积方面具有相类似的作用,MDCP作为一种新型磷源添加剂,和MCP相比成本更低。因此在实际饲料生产过程中,可考虑将MDCP作为一种优先的磷源候选添加剂。