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目的:为了探讨FA对AA的治疗效果及其作用机制,给佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)大鼠静脉注射氟比洛芬酯注射液(flurbiprofen axetil injection, FA),观察大鼠的热缩足反射潜伏期(TWL)、关节炎指数(AI)及滑膜组织的组织学和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎症蛋白-lα(MIP-1α)、Bcl-2的变化,并与灌服塞来昔布的作用相比较,为临床治疗RA提供实验依据。方法:将清洁级健康雄性Wistar大鼠40只,随机分成4组,每组10只:A组为正常对照组,B组为AA模型对照组,C组为灌服塞来昔布组,D组为静脉注射FA组。A组在大鼠右后足跖皮内注射生理盐水0.2ml。B、C、D三组大鼠在其相同位置注射完全弗氏佐剂(CFA,每1ml CFA含5mg高温干燥灭活的结核杆菌)0.2ml致炎,注射后致炎侧关节呈急性炎症反应,踝关节、足趾红肿,18～24h达高峰,持续5天后逐渐减轻;8～10天后,大鼠四肢的踝关节和足趾再次出现红肿,即确定为大鼠AA模型[1]。造模成功后稳定5天,即于造模后第15天,C组灌服塞来昔布20mg/100g,D组尾静脉注射FA 3mg/100g,B组尾静脉注射与D组相同容量的生理盐水,各组均连续用药8天,每日定时给药一次。整个实验期间大鼠自由饮食。分别于造模前、造模后的第3、14、18、21、24天观察记录各组大鼠注射侧与对侧足爪肿胀程度的变化,并对AI进行评分。于造模前、造模后第1、14、17、20、24天测定大鼠的TWL。各组大鼠于造模后第24天(末次给药后第二天)处死并取材处理,在光镜下观察各组大鼠踝关节滑膜组织的病理学形态改变,电镜下观察滑膜细胞中细胞器的改变,免疫组化染色检测滑膜组织中MCP-1、MIP-1α、Bcl-2的表达,并应用图像分析系统对结果进行半定量分析。结果:1关节肿胀程度的测量在造模后第3天、第14天时,B、C、D三组大鼠注射侧均出现足爪的红肿,且显著高于A组(P<0.05);第14天时对侧肿胀显著高于A组(P<0.05)。在造模后第15天开始给药,B组大鼠足爪肿胀程度随时间延长呈进行性上升趋势。C组大鼠注射侧体积在第18天时比第14天时仍有轻微增加(P<0.05),与B组比无明显差异(P>0.05),但在第21天、第24天时比第14天时显著减小(P<0.05),同时也明显小于B组(P<0.05);C组对侧在第18天、第21天时与第14天时比无明显差异(P>0.05),而在第24天时才明显小于第14天时(P<0.05),但在给药后的这三个时间点均明显小于B组(P<0.05)。D组大鼠注射侧足爪肿胀程度在第18天时不再增大,第21天、24天时已明显小于第14天时,在这三个时间点均明显小于B、C两组(P<0.05);而对侧在第18天时与C组无明显差异(P>0.05),但明显小于B组,第21、24天时小于B、C两组,并且在这三个时间点时均明显小于第14天时(P<0.05)。2关节炎指数(AI)评分造模后第14天,B、C、D三组关节炎症状均明显,AI无显著差异(P>0.05),B组AI随时间延长呈进行性上升趋势。给药3天后,即造模后第18天时,C、D两组AI评分均无明显变化,两组间无明显差异(P>0.05),但D组明显低于B组(P<0.05),而在第21、24天时C、D两组AI评分已明显低于第14天时,同时均低于B组(P<0.05),第24天时D组已明显低于C组(P<0.05)。3热缩足反射潜伏期(TWL)于造模后14天内,B、C、D各组大鼠TWL均明显短于A组(P<0.05)。给药后2天内C、D两组TWL迅速回升,在造模后第17天时已明显长于B组(P<0.05)。C、D两组于造模后第20天时与B组比显著延长(P<0.05),同时D组比C组明显延长(P<0.05),但仍短于A组(P<0.05)。而在第24天时A、D两组已无明显差异(P>0.05),恢复至正常水平。4光镜观察A组滑膜细胞多呈单层,且排列规则,滑膜组织未见新生血管及明显的炎性细胞。B组大鼠关节滑膜细胞明显增生,滑膜细胞层次增多可达7~11层,排列紊乱,滑膜成纤维细胞明显增殖;滑膜组织中有大量炎性细胞浸润,形成“淋巴样小结”或“淋巴滤泡”;部分出现滑膜组织水肿,基质淡染;滑膜血管增多,血管周围可见大量炎性细胞浸润,血管翳形成。C组大鼠滑膜细胞增生仍较明显,有少量血管翳和炎细胞浸润。D组滑膜略增厚,滑膜组织中炎性细胞明显减少,局部滑膜有轻度增生。5 AA大鼠滑膜MCP-1、MIP-lα和Bcl-2的表达A组大鼠滑膜组织仅见极少量MCP-1、MIP-1α和Bcl-2阳性表达,B组中MCP-1、MIP-1α在大鼠滑膜衬里层、衬里下层,血管周围及滑膜成纤维细胞均有较强表达,Bcl-2在滑膜衬里层表达极高。C组的各项指标的表达比B组明显减少(P<0.05),但仍强于D组(P<0.05),而D组的表达比A组强(P<0.05)。6电镜观察A组滑膜细胞膜及核膜完整,核染色质均匀、疏松;线粒体内嵴突清晰可见;粗面内质网结构正常。B组细胞膜、核膜不完整,染色质呈团块状;线粒体显著增多,肿胀,嵴突破坏,有嵴和膜的融合、消失;细胞内粗面内质网异常丰富并呈池状扩张,成群的核糖体散布于其周围。C组可见不同程度的滑膜细胞肿胀,核染色质密度较高;线粒体肿胀、嵴突破坏较轻;粗面内质网较丰富。D组细胞结构基本恢复正常,核膜清晰完整,核染色质趋于正常;线粒体肿胀轻微,嵴突完整;粗面内质网略有扩张,但数量减少。结论:1大鼠右后足跖皮内注射CFA可成功复制AA模型。2静脉注射FA比灌服塞来昔布对大鼠AA的治疗作用更强。3 FA治疗AA的作用机制可能与其下调Bcl-2表达,促进滑膜细胞凋亡有关。