【摘 要】
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目的:通过建立大鼠慢性睡眠剥夺模型,研究大鼠行为学改变、颞下颌关节髁突软骨组织形态变化和颞下颌关节髁突软骨中IL-1β、TNF-α、MMP-2、MMP-9、IGF-I和VEGF的表达变化。方法:将60只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为3组,分别为实验组,对照组和恢复组。利用改良多平台法（MMPM）对实验组和恢复组大鼠进行慢性睡眠剥夺。通过旷场实验评估大鼠睡眠剥夺模型建立效果。在睡眠剥夺的第1、第
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目的:通过建立大鼠慢性睡眠剥夺模型,研究大鼠行为学改变、颞下颌关节髁突软骨组织形态变化和颞下颌关节髁突软骨中IL-1β、TNF-α、MMP-2、MMP-9、IGF-I和VEGF的表达变化。方法:将60只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为3组,分别为实验组,对照组和恢复组。利用改良多平台法（MMPM）对实验组和恢复组大鼠进行慢性睡眠剥夺。通过旷场实验评估大鼠睡眠剥夺模型建立效果。在睡眠剥夺的第1、第2、第3、第4周结束时分别处死实验组和对照组5只大鼠。恢复组大鼠完成睡眠剥夺后笼养恢复睡眠1周后处死。大鼠处死后取双侧颞下颌关节。通过HE染色方法观察颞下颌关节髁突的形态学变化,免疫组化法检检测IL-1β、TNF-α、MMP-2、MMP-9、IGF-I和VEGF在髁突软骨内的表达水平的变化。结果:1.旷场实验中各实验组及恢复组在结束慢性睡眠剥夺时水平得分与垂直得分均高于对照组大鼠,具有统计学意义（P<0.05）。恢复组经过1周时间睡眠恢复后水平得分与垂直得分与对照组无明显差异（P>0.05）;2.实验组大鼠随睡眠剥夺时间的增加,髁突软骨组织逐渐出现退行性改变。HE染色观察发现,慢性睡眠剥夺后髁突软骨出现了表层纤维带分裂剥脱,增殖带与纤维软骨带细胞界限变得模糊不清,软骨下骨向软骨深层长入。恢复组与实验组相比,表层纤维带的裂隙减小,或是部分裂隙被纤维样组织占据但内部尚无细胞长入。局部纤维软骨带肥大细胞层数有增加,但与周围细胞界限清晰。3.免疫组化结果显示:IL-1β、TNF-α、MMP-2、MMP-9在各时间点实验组中的阳性表达强度高于对照组,有显著性差异（P<0.05）,各时间点恢复组阳性表达强度低于实验组,有显著性差异（P<0.05）。IGF-I和VEGF在实验组中的阳性表达强度均高于对照组,有显著性差异（P<0.05）。在慢性剥夺1、2、3周后的恢复组IGF-I和VEGF的阳性细胞表达强度明显下降,与实验组有显著性差异（P<0.05）。慢性睡眠剥夺4周后的恢复组IGF-I和VEGF阳性表达强度与对应时间的慢性睡眠剥夺组并未有显著性差异（P>0.05）。结论:1.改良多平台法可以有效引起Wistar雄性大鼠的应激性反应,是一种简单有效的慢性睡眠剥夺模型建立方式。2.慢性睡眠剥夺可以引起髁突软骨内发生炎症性变化,应用慢性睡眠剥夺建模研究颞下颌关节骨关节炎的病理机制是一种合适的选择。3.慢性睡眠剥夺可以引起髁突软骨内IL-1β、TNF-α的表达增加,加重髁突软骨的关节炎表现。4.慢性睡眠剥夺可以导致髁突软骨组织内的MMP-2、MMP-9的表达增加,会加重破坏软骨基质。5.慢性睡眠剥夺可以导致髁突软骨组织内IGF-I表达的增加,对髁突软骨发挥保护和促进改建的作用。6.慢性睡眠剥夺可以导致髁突软骨组织内VEGF表达的增加,加重髁突软骨的炎症性表现,使髁突软骨发生破坏。7.慢性睡眠剥夺停止后,经过1周时间恢复大鼠髁突软骨组织内IL-1β、TNF-α、MMP-2、MMP-9、IGF-I和VEGF表达有所下降,髁突软骨进行恢复性改建。但长时间的慢性睡眠剥夺后髁突软骨可能需要更长的恢复时间。
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