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在世界范围内,癌症的发病率和死亡率都在迅速上升。尽管近几十年来对于癌症治疗的研究已经取得了巨大进步,但是对于癌症治疗我们仍然面临着适应性耐药等巨大挑战。天然药物作为抗肿瘤药物的主要来源之一,在抗肿瘤药物的研发中具有至关重要的作用。从木犀科中分离出来的裂环烯醚萜具有众多生物活性和药理作用,现已被广泛用于食品和医药领域,抗肿瘤活性是其主要生物活性之一。本次研究的目的是探究木犀科来源的10-hydroxyoleoside 11-methyl ester（化合物1）、10-hydroxyoleoside dimethyl ester（化合物 2）、10-hydroxyligustroside（化合物 3）和Multifloroside（化合物4）这四种裂环烯醚萜苷的体外抗肿瘤细胞增殖活性及其作用机制。1、抗肿瘤细胞增殖作用及构效关系分析应用MTT法检测化合物1-4对人非小细胞肺癌A549和人表皮鳞癌A431细胞增殖作用的影响。实验结果表明:化合物1、3和4具有不同程度的抗A549细胞增殖活性;化合物1、2和4具有不同程度的抗A431细胞增殖活性;Multifloroside对A431细胞增殖的抑制作用最强。构效关系表明C7位引入3,4-二羟基苯乙基是Multifloroside抗A431细胞增殖活性的关键。2、Multifloroside抗人表皮鳞癌A431细胞增殖的作用机制研究检测Multifloroside对A431细胞克隆形成的影响。实验结果显示:Multiflorosid 200和100 μM组A431细胞克隆形成率均为0;50 μM和25 μM组细胞克隆形成率分别为46%和24%,且克隆团明显小于空白对照组。实验结果表明:Multiflorosid能够显著抑制A431细胞克隆形成。应用流式细胞术依次检测Multiflorosid对A431细胞凋亡和周期的影响。实验结果显示:Multiflorosid在高浓度200 μM时可诱导A431细胞凋亡;5、50、100和 250μMMultiflorosid 组 A431S 期细胞比例依次为 28.55%、31.78%、49.29%和55.30%,与空白对照23.20%相比显著升高（p<0.001）,且呈剂量依赖关系。应用流式细胞术依次检测Multiflorosid对A431细胞内活性氧水平（Reactive Oxygen Species,ROS）和线粒体膜电位（Mitochondrial Membrane Potential,MMP）的影响。实验结果显示:Multiflorosid 50和100 μM组A431细胞的ROS水平分别为74.44%和85.59%,与空白对照58.33%相比显著升高,且呈剂量依赖关系;50和100μM Multiflorosid也能使A431细胞的MMP显著升高。应用 Western Blot 检测 Multiflorosid 对 A431 细胞周期蛋白 cyclin A2、cyclinD 1和p21的影响。实验结果显示:Multiflorosid25、50、100和250 μM组A431细胞的cyclin A2和p21蛋白表达水平依次上调,cyclin D1依次下调。3、研究结论:Multifloroside抗A431细胞增殖活性最强;Multiflorosid通过细胞周期S期阻滞以及增加A431细胞中ROS水平影响线粒体功能进而发挥其抗肿瘤作用。本次课题研究为Multiflorosid及其衍生物抗肿瘤增殖作用研究提供新的参考。