在耳蜗中，ATP（三磷酸腺苷）作为神经递质或调质，其作用是比较复杂的。近年来，有关ATP在耳蜗中的作用的研究已经积累了丰富的资料。在生理状态下，耳蜗内有一定的ATP合成和释放，这使得内外淋巴液中ATP都可达到一定的基础浓度。耳蜗柯蒂氏器的细胞上分布有嘌呤能受体，当ATP与这些受体结合时，可以引起感觉毛细胞和耳蜗支持细胞内的Ca²⁺浓度升高。另一方面，ATP经外淋巴灌注时，可以影响到各种耳蜗电位如：CM（耳蜗微音器电位）、CAP（复合动作电位）、SP（总和电位）等。而NO／cGMP（一氧化氮／环磷酸鸟苷）途径作为一种信号传导系统，广泛参与哺乳动物多种生理功能调节。有研究提示：NO／cGMP途径存在于内耳中，参与调节耳蜗微循环和支持细胞的生理乃至影响整个耳蜗的功能。过去人们对两者单独作用的研究比较多。但是，有关这两者在内耳中的关系尚未见报道，因此，人们对内耳生理学在这方面的了解仍然是不完整和不透彻的。为此，我们设计了这个试验，以阐明在耳蜗中ATP和NO／cGMP途径的关系，从而有利于人们从整体上综合地了解耳蜗的一些生理过程。本研究分成两个部分。 一、豚鼠耳蜗离体灌流DEA-NO可以引起耳蜗组织中cGMP含量的变化 为了研究耳蜗中ATP和NO／cGMP途径的关系，我们选择cGMP在豚鼠耳蜗组织中的含量作为观察指标。豚鼠快速断头，取听泡，暴露耳蜗，蜗尖及两窗钻孔，经蜗尖行全耳蜗灌流：对照组只灌流人工外淋巴液；试验组1灌流含有DEA-NO（乙二胺—氧化氮亲核复合体，一种一氧化氮供体）的人工外淋巴液，试验组2灌流含有DEA-NO和鸟苷酸环化酶（sGC）抑制剂ODQ（1H-[1，2，4]草酸重氮[4，3-a]喹恶啉）的人工外淋巴液，灌流后分离蜗轴并将其于-70℃冷冻保存。待标本收集齐后进行放射免疫实验，测定蜗轴组织中的平均cGMP含量。结果，向离体耳蜗中灌注lmM DEA-NO溶液 豚见耳蜗伞叮P与m／cGW远径关系的研究 摘 耍 可以引起耳蜗组织中cGMP含量的显著增加，先灌注ODQ后灌注lmM DEA－NO耳蜗组织中cGMP合成量明显少于单独灌注lmM DEA．NO，但仍 高于对照组。我们的实验结果表明，使用离体全耳蜗灌流的方法来改变耳蜗 组织中。GMP含量以及用放射免疫测定耳蜗组织中cGMP含量的方法是可 行而且可靠的。这两种方法在以前的文献中均未见报道。 －A17I：)＄＃MRI8gtR4cGMPMlIfffR 利用离体全耳蜗灌注和放射免疫测定的方法研究耳蜗中ATP 与 NO／。GMP途径的关系。试验动物分为五组，分别灌注APL基础液、ATP、 A毛 87、L－NNA＋ATP以及 ODQ＋ATP(中文全称参见缩略词表人 结果发 现：m卜MA毛刀87和330pM ATATP灌流可以引起耳蜗组织中CGMP含量显 著增加，而提前灌流NOS（一氧化氮合酶）抑制剂 L－NNA（左旋－N“．硝基 精氨酸）和 SGC（可溶性鸟昔酸环化酶）抑制剂 ODQ均可明显抑制 ATP引 起的。GMP含量增加。试验结果提示我们：ATP引起的CGMP含量增加过 程有＊＊8和s＊C 的参与：向耳蜗内灌流AT P可以激活耳蜗组织中的 NO／CGMP途径，其机理是 ATP通过引起细胞内 CaZ“浓度升高可以激活 NOS 产生NO并进一步激活 SGC。ATP和 NO／cGMP途径在耳蜗中的作用不是 相互独立，而是有着密切的关系。ATP引起内耳细胞内的Caz“浓度升高，而 NO儿GMP途径可以降低细胞内高浓度的CaZ＼ 可见后者对前者具有负反馈 调节的作用，二者共同调节耳蜗内细胞乃至整个耳蜗的生理功能。因此，我 们认为在耳蜗中存在ATPC”－－－－mo儿GMP途径。