γ-干扰素对家兔十二指肠平滑肌运动的影响及作用机制

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γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)是在抗原侵入机体时,主要由NK细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞等分泌产生的具有广泛生物学作用的34kDa的同型二聚体蛋白。临床上γ干扰素广泛地应用于感染类,肿瘤类疾病的治疗,但往往伴随出现厌食、频繁呕吐、腹泻,缓慢消瘦等以十二指肠运动异常为诱因的不良反应。因此,十分有必要探讨γ干扰素调控十二指肠运动的作用规律与机制。γ干扰素受体(Interferon R-γ,IFN-γR)是靶细胞上介导IFN-γ生理学作用的基础。众所周知,自主神经系统是调节消化系统活动的主导系统之一。本试验采用免疫荧光标记技术检测IFN-γR与乙酰胆碱受体(M2m Ach R)和肾上腺素受体(β3AR)在家兔十二指肠各层上的分布特点;采用BL-420F生物信号采集与分析系统检测IFN-γ与氯化铵甲酰胆碱对十二指肠运动的协同调节作用规律与机制。获得了以下主要结果:1、免疫荧光染色结果表明:家兔十二指肠中IFN-γR免疫荧光阳性产物主要分布于外膜、黏膜下层,黏膜层(黏膜的固有层,黏膜肌层)和肌层有少量阳性产物分布。M2m Ach R免疫阳性产物主要分布于肌层,内纵层外环层平滑肌均有明亮的绿色荧光,为强阳性。β3AR阳性产物主要分布于肌层和黏膜层,肌层平滑肌呈暗绿色荧光,为弱阳性,黏膜层内阳性产物分布于固有膜内的结缔组织细胞和小淋巴细胞上,呈明亮的亮绿色荧光。2、不同浓度IFN-γ对十二指肠运动指数的影响试验结果表明:IFN-γ在低剂量时表现出对十二指肠指数的轻微促进作用,而在较高浓度时呈现出一定水平的抑制作用。3、IFN-γ与梯度浓度氯化铵甲酰胆碱对十二指肠运动指数协同作用研究结果表明:随着乙酰胆碱的加入,IFN-γ对十二指肠运动指数的影响变为抑制作用,在IFN-γ浓度为25万IU/kg时抑制作用最为明显。低剂量IFN-γ条件下,不同浓度乙酰胆碱调节下的肌电指数曲线走势相对一致,而当IFN-γ剂量较高时,不同浓度乙酰胆碱调节下的肌电指数曲线走势就表现出了相对的复杂性。以上结果表明:(1)形态学结果揭示,十二指肠肌层平滑肌细胞不是IFN-γ直接作用的靶点。(2)IFN-γ对十二指肠运动指数的影响表现为:IFN-γ对十二指肠具有低剂量促进高剂量抑制的作用。(3)IFN-γ与胆碱能神经系统对十二指肠运动指数作用特点表明:乙酰胆碱存在条件下,IFN-γ对十二指肠平滑肌肌电活动指数产生抑制作用的剂量明显降低。推测:IFN-γ对十二指肠平滑肌的作用是通过胆碱能神经系统间接发挥的。
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