论文部分内容阅读
目的:对大鼠腹腔注射野百合碱(monocrotaline,MCT)并诱导建立肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)模型,并通过Rac1基因、血小板衍生生长因子B(platelet-derived growth factor B,PDGF-B)、白介素6(interleukin-6,IL-6)在肺组织中的表达来阐明肺动脉高压形成及匹伐他汀(Pitavastatin)对肺动脉高压的治疗机制。方法:将已经溶解好的MCT溶液用灭菌过的玻璃注射器按55mg/kg的剂量一次性腹腔注射以诱导大鼠PAH。采用等量生理盐水(0.9%Na Cl)腹腔注射做空白实验对照。将干净的50只雄性SD大鼠随机均分为5组,分别为空白组(Blank)、模型组(Model)、匹伐他汀预防组(1mg.kg-1.d-1,Pit P1p)、匹伐他汀高剂量治疗组(3mg.kg-1.d-1,Pit3p)、匹伐他汀低剂量治疗组(1mg.kg-1.d-1,Pit1p)。除Blank组外其余4组均腹腔注射MCT。其中Pit P1p组自MCT注射当日起每日给予匹伐他汀(1mg.kg-1.d-1)灌胃至第8周末。Pit3p组(3mg.kg-1.d-1)和Pit1p组(1mg.kg-1.d-1)在第4周末开始给予匹伐他汀灌胃至第8周末。Model组和Blank组大鼠用0.9%Na Cl灌胃至第8周末。当实验结束,通过生理多导记录仪测定各组大鼠的平均肺动脉压(m PAP)、右室压(RVP)并计算右心指数[RV/(LV+S)];采用HE染色并用光镜观察肺小动脉管壁,再计算其厚度与血管外径之比(WT%)及管壁面积占血管总面积的百分比(WA%);免疫组化染色方法检测PDGF-B蛋白在肺小动脉中的表达;real-time PCR法检测肺组织Rac 1的m RNA;ELISA检测肺组织中IL-6含量。结果:1存活情况:第8周末,Blank组大鼠全部存活,Pit P1p组、Pit1p组、Pit3p组和Model组大鼠的存活率分布为80%、60%、80%、40%,并且各组与Model组比较差异显著(P<0.05)。2肺小动脉形态学观察和血流动力学测定:Model组与Blank组相比较,m PAP值、肺小动脉管壁增厚和右心室肥厚程度显著升高(P<0.05);Model组与Pit P1p组、Pit1p组、Pit3p组相比较,上述各项检查的检测值也升高,并且差异显著(P<0.05)。3肺的PDGF-B、Rac1m RNA和IL-6的表达:与Model组比较,Pit P1p组、Pit1p组及Pit3p组大鼠的肺小动脉中均不同程度地抑制了PDGF-B的表达,均显著的低于Model组大鼠(P<0.05);Pit1p组与Pit3p组相比较,上述蛋白的表达也有差异(P<0.05)。Rac1 m RNA的表达在Blank组中低,Pit P1p组相对较高、Pit1p组较高,Model组最高,各组与Model组比较有显著差异(P<0.05);IL-6的表达量同样是Model组最高,各组与Model组比较,IL-6的表达值显著降低(P<0.05)。结论:1通过对大鼠腹腔注射一定剂量的MCT,一段时间后能够成功诱导大鼠形成肺动脉高压;匹伐他汀能够抑制大鼠肺小动脉平滑肌(pulmonary arterial smooth muscle cell,PASMC)增殖、肥大,能改善肺小动脉结构的重塑,减轻右心室室壁肥厚,降低m PAP。2匹伐他汀能够预防和治疗大鼠肺动脉高压,其可能的机制是通过对Rac1基因和PDGF-B表达的调节,并抑制PASMC增殖和抑制炎症介质IL-6等机制来实现的。