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[目的]本文通过Real-time PCR检测两种加成型硅橡胶印模消毒前和浸泡消毒后3个不同时间点乙型肝炎病毒拷贝数的变化,来评价三种化学消毒剂对携带乙型肝炎病毒人工唾液污染硅胶印模的消毒效果。遴选出临床上合适的印模消毒剂和消毒时间。为临床开展硅橡胶印模消毒提供实验基础。[方法]1.配制2%强化戊二醛；1%优氯净；cavicide消毒剂的中和剂；按化学消毒剂中和剂鉴定原则,对三种化学消毒剂的中和剂进行鉴定,筛选出3种化学消毒剂针对携带乙型肝炎病毒人工唾液污染硅橡胶印模消毒实验有效的中和剂。2.应用Real-time PCR评价化学消毒剂对两种硅橡胶印模消毒效果,选择临床上消毒效果肯定的二种化学消毒剂(2%强化戊二醛；1%优氯净)和一种新型化学消毒剂(Cavicide消毒液)对两种携带有乙型肝炎病毒人工唾液污染的硅橡胶印模(3M加成型硅橡胶；GC加成型硅橡胶)进行消毒。设置三个不同的消毒时间点,达到预设时间点后,向消毒剂中加入该消毒剂的中和剂,终止消毒反应。提取硅橡胶上残留的HBV-DNA,应用Real-time PCR对HBV-DNA进行扩增,通过比较HBV-DNA消毒前后拷贝数的变化,得出消毒剂不同时间点的消毒效率。定量评价不同消毒剂在不同时间点对乙肝病毒的灭活效果。[结果]1.通过化学消毒剂中和剂鉴定实验,得到Real-time PC R评价中和剂鉴定表。2.Real-time PCR在评价3种消毒剂消毒效率后,Cavicide消毒液能在6分钟灭活硅橡胶印模表面乙型肝炎病毒99.9%；1%优氯净10分钟灭活硅橡胶印模表面乙型肝炎病毒99.4%；2%强化戊二醛35分钟灭活硅橡胶印模表面乙型肝炎病毒99.6%。新型消毒剂Cavicide浸泡消毒6分钟能有效杀灭乙型肝炎病毒,2%强化戊二醛杀灭乙肝病毒的有效时间为35分钟,1%优氯净杀灭乙型肝炎病毒的有效时间为10分钟。[结论]1.在乙型肝炎病毒污染硅橡胶印模消毒实验中,通过中和剂的鉴定试验。选择0.5%甘氨酸+1%卵磷脂+1%吐温80PBS为2%强化戊二醛的中和剂,0.5%硫代硫酸钠为1%优氯净的中和剂,65克/升的吐温-80+10克/升卵磷脂+10克/升甘氨酸组成的PBS缓冲液作为Cavicide的中和剂。2.Real-time PCR在评价三种消毒剂消毒前后HBV-DNA拷贝数发现,Cavicide消毒液能在6分钟灭活硅橡胶印模表面乙型肝炎病毒99.9%；1%优氯净10分钟灭活硅橡胶印模表面乙型肝炎病毒99.4%；2%强化戊二醛35分钟灭活硅橡胶印模表面乙型肝炎病毒99.6%。其中新型消毒剂Cavicide能在6分钟灭活病毒99.9%以上。消毒时间短,故新型消毒剂Cavicide是临床上较理想的印模消毒剂。