恶性肿瘤是世界范围内主要致死性疾病之一。传统治疗手段在临床上无法根治恶性肿瘤且伴有毒副作用。近几十年来,通过对肿瘤分子机制不断的深入研究,针对癌症的发生中起关键作用的靶分子及其调控的信号转导通路的特异性分子的靶向治疗,引发抗癌治疗理念的变革。分子靶向治疗作为肿瘤治疗的新策略,因具有特异性、选择性强,副作用小等治疗优势,逐渐被应用并在临床取得了成功。精准靶点的确定是分子靶向治疗策略的关键,也是研究攻克肿瘤的主要难点。目前已有多种单克隆抗体作为肿瘤分子靶向药物进入临床或市场,结果显示该类大分子靶向药物具有较好的反应疗效,同时具有较轻甚至没有药物的不良反应。肿瘤相关分子(Tumor associated molecule,TAM)CD98是近年来报道较多的跨膜糖蛋白分子。研究显示,CD98分子在不同种类的恶性肿瘤中呈现异常表达,并且参与肿瘤发生,增殖以及代谢等多种生物学事件,而通过干涉、敲除、阻断等方式抑制CD98的异常表达后,可以肿瘤的恶性表型有所好转。本研究旨在基于人源转基因小鼠筛选出靶向人CD98(CD98hc,SLC3A2)的人源单抗,对其亲和力、特异性级进行鉴定并对单抗的抗肿瘤功能进行探索。本课题主要包括以下三部分工作:第一部分,CD98分子作为抗体靶向治疗靶点的确定。我们通过十种发病率和致死率较高肿瘤的组织芯片,713例肿瘤组织样本和260例癌旁或正常组织样本,经免疫组织化学及免疫荧光实验,统计学分析结果提示:CD98是一种肿瘤相关的生物标志(Biomaker)。此外,通过100对结肠癌及癌旁组织预后分析,CD98的高表达与结肠癌不良预后有关,可作为一个独立预后因素。第二部分,人源抗体转基因小鼠筛选靶向CD98全人源抗体。首先,我们构建了CD98抗原的原核系统表达,之后用转人抗体基因小鼠筛选获得靶向CD98全人源抗体的细胞系,具体方法是:通过全人抗体转基因小鼠进行目标抗原CD98的免疫并进行杂交瘤筛选和制备稳定的单克隆抗体高表达细胞株。通过此方法我们获得了四株表达靶向CD98人源抗体的细胞株。第三部分,对所获得的靶向CD98人源抗体的鉴定及其抑瘤作用及功能机制。这一部分研究中,我们用ELISA间接法,Western Blot,免疫组织化学等试验对表达抗CD98的人源抗体CD98-1,CD98-2,CD98-3,CD98-4的亲和力及特异性鉴定,结果显示这四株抗体能和细胞及组织中表达的CD98特异结合且亲和力较好;所制备的抗体均能与原核表达的CD98相互作用。进一步大量纯化上述人源单克隆抗体,用CCK8试验检测了单抗CD98-1对结肠癌细胞生长的影响,发现CD98-1具有抑制结肠癌细胞增殖作用。CD98分子的人源单抗的研发为基于该分子的肿瘤靶向治疗提供新的选择和策略,同时为理解该分子在肿瘤和正常组织的功能及机制奠定了基础。