论文部分内容阅读
本文利用简并引物PCR和RACE技术,从黄瓜中克隆到CsMAPK cDNA的保守序列,运用NCBI中Blastx进行氨基酸同源比对结果表明,克隆的这个保守区序列与其他植物的MAPK基因有很高的同源性(>80%),其中与拟南芥ATMPK20基因同源性最高(90%)。同源性比对结果表明已成功克隆到了黄瓜CsMAPK保守序列。另外,利用软件做出的一个保守区同源进化树,同样说明克隆到了黄瓜CsMAPK保守序列。为进一步验证该序列的功能,基于病毒诱导基因沉默的原理,将构建烟草花叶病毒载体,建立黄瓜RNA干扰体系,对该基因进行功能验证。由于长春花具有很强的观赏价值,开花时期长,品种多样,花色鲜艳,将广泛应用于2010年上海市世博会。本文利用分子标记分析了长春花种质资源遗传多样性,为长春花的遗传育种研究提供一定参考。本论文优化了长春花ISSR-PCR体系,并利用ISSR分子标记技术对40个长春花种质资源进行了遗传关系分析,多态性PCR扩增结果表明:在115个位点,其中多态位点78个,多态位点百分率为67.8%,多态性较高;POPGENE32软件计算结果表明,40个长春花品种平均有效等位基因数为1.6384, Nei遗传多样性指数平均为0.3735,平均Shannon信息指数为0.5546;应用NCSYS软件计算得到品种间的遗传相似系数介于0.150～0.900,平均为0.584。通过聚类分析将这40个长春花种质分成7组,该聚类结果与以前根据形态进行的分类结果有极大的相似性。该研究将为长春花品种鉴定和品种保护提供依据,为长春花种质资源亲缘关系的确定及杂交育种提供理论依据。