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大量临床发现针刺内关有改善冠心病患者心功能,实验研究从改善心肌能量代谢障碍、减少氧自由基生成、调整血管内源性保护物质等方面已得到证实,但未见从整体、细胞、分子水平研究电针不同经脉(穴)治疗心肌缺血再灌注损伤的钙超载调节机制。 目的:从细胞、分子水平研究电针内关对缺血再灌注损伤心肌的钙超载调节机制,并选择心经(穴)、大肠经(穴)作对比研究,探讨手厥阴心包经(内关)与心相关、经脉脏腑相关具有特异性。 方法:50只大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、内关组、神门组和合谷组,采用经典的冠脉结扎法建立心肌缺血再灌注模型,以电针内关作为主要观察对象,与电针神门、合谷进行比较,观察心电图ST段、T波、QX/QT比值的变化,用双波长荧光分光光度计测定心肌细胞内钙离子含量、定磷法测定Ca2+-ATPase、Na+-K+-ATPase活性,用RT—PCR法分析Ca2+-ATPasemRNA、Na+-K+-ATPasemRNA表达,光镜和电子显微镜观察心肌组织形态和超微结构变化。 结果:①心肌缺血再灌注时心电图ST段、T波及QX/QT升高,电针内关、神门有不同程度的促进心电图ST段、T波及QX/QT的恢复,尤以内关明显,但神门降低QX/QT作用不明显,与模型组间无统计学意义(P>0.05)。电针合谷对心电图ST段、T波QX/QT影响不明显,与模型组间差异无显著性(P>0.05)。 ②缺血再灌注损伤时心肌细胞内钙离子增加,电针内关能降低钙离子含量,与神门、合谷组比较有非常显著性差异(P<0.01),但仍高于假手术组(P<0.05),而神门、合谷组心肌细胞内钙离子有下降趋势,但与模型组间差异无显著性(P>0.05)。 ③缺血再灌注损伤心肌钙泵和钠泵活性降低,电针刺内关在一定程度湖南中医学院2001级博士研究生毕业论文中文摘要上能增强此两种酶活性(P<0.01),神门也有抑制钙泵活性降低的作用,但低于内关组(P<0 .01)。神门和合谷对钠泵的作用不明显,与模型组间无显著性差异(P>0.05)。 ④缺血再灌注损伤心肌钙泵和钠泵的基因表达下调,电针内关能上调钙泵和钠泵的基因表达,与模型组比较有非常显著性差异(P<0 .01),神门也有促进钙泵表达上调的作用,但低于内关组(P<0 .05)。电针神门和合谷对钠泵基因表达的影响不明显,与模型组间比较无统计学意义(P>0 .05)o ⑤电针内关能更好地促进缺血再灌注损伤心肌组织形态和超微结构的修复,神门有一定的改善作用,而合谷作用不明显. 结论:①电针内关通过上调心肌钙泵和钠泵基因表达,增强钙泵和钠泵活性,降低心肌细胞内钙离子含量,从而达到抑制钙超载,实现对心肌组织的保护作用,表现为促进心电活动、心肌组织形态和超微结构的恢复。 ②出现内关与神门对心肌保护作用的差异性可能是公主血脉和心藏神的内在表现,也就是说以内关为代表的手厥阴心包经穴治疗心血管系统疾病为主,而神门为代表的手少阴心经穴治疗神经系统疾病为主. ③电针内关对心肌细胞较明显的保护作用,可’能是经脉(穴)一脏腑相关特异性的依据之一。