间接毛细管电泳—安培检测技术及其应用基础研究

被引量 : 0次 | 上传用户:lzb0008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
毛细管电泳(Capillary Electrophoresis, CE)又称高效毛细管电泳(High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE),具有分离效率高、快速、样品用样量少等特点。CE的分离对象包括无机离子、有机分子、DNA、生物大分子以及对映体等,在分析化学、生物化学、分子化学、药物化学、食品化学、环境化学和临床化学等许多领域,有着广泛的应用前景。绪论中回顾了CE技术的发展历史,介绍了其原理、分离模式、仪器系统和技术特点;重点对毛细管电泳-安培检测(CE-AD)技术进行了详细的介绍;根据本论文的研究内容,侧重论述了CE技术在食品和临床分析中的应用。本论文采用间接CE-AD技术着重探讨了饮料及调味品中四种电活性和两种非电活性防腐剂的同时检测;苯丙酮尿症患者两种尿样标志物,即具有电活性的苯丙酮酸及非电活性苯乙酸的快速分析;以及运动前后乳母体液中乳酸含量的变化,进一步拓展了CE-AD技术在食品分析和临床分析中的应用。本实验采用间接毛细管电泳-安培检测法(CE-AD)同时测定了食品中的多种电活性和非电活性防腐剂。实验以长度为75 cm的熔融石英毛细管(内径25μm,外径360μm)为分离通道,以直径300μm的碳圆盘电极为工作电极,电极电位为+1100 mV (vs. SCE),分离电压为16 kV,进样时间为8 s/16 kV,运行液为含有0.018 mmol/L电活性物质3,4-二羟基苄胺、12 mmol/L表面活性剂SDS、浓度40 mmol/L的硼砂-硼酸缓冲液(pH 8.2)。在上述优化条件下,食品中的四种电活性(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯)和两种非电活性防腐剂(山梨酸钾和乳酸钠)达到了较好的分离,最低检测限(S/N=3)范围为1.06×10-8~2.73×10-g/mL。此法已被成功用于乳饮料、酱油等食品中电活性和非电活性防腐剂的同时检测,结果令人满意。首次采用间接毛细管电泳-安培检测法(CE-AD)同时测定了苯丙酮尿症患者尿液中的两种疾病标志物:具有电活性的苯丙酮酸及非电活性的苯乙酸。考察了运行液添加剂、SDS浓度、工作电极电位等因素对分离和检测的影响。优化实验条件下,以直径300μm碳圆盘电极作为工作电极,电极电位为+950mV(vs. SCE),在运行液为0.018 mmol/L 3,4-二羟基苄胺/20 mmol/LSDS/60 mmol/L硼砂-硼酸缓冲液(pH 7.8)中,两种标志物在15min内可实现基线分离。苯丙酮酸和苯乙酸的检测限分别为0.50和0.92 mg/L(S/N=3)。苯丙酮酸和苯乙酸的浓度与峰高分别在3.0~1.0×103mg/L、2.0~5.0×103mg/L范围内呈良好线性,峰高与迁移时间的相对标准偏差分别为4.4%、3.2%(苯丙酮酸)和2.2%、4.3%(苯乙酸)该方法已成功用于健康婴儿和苯丙酮尿症患儿尿液中两种标志物的分析测定,且完全避免了尿液中主要同存物尿酸对标志物测定的干扰,有望用于苯丙酮尿症患儿的早期无创诊断。本实验采用间接毛细管电泳-安培检测法(CE-AD)测定了哺乳期妇女在运动前后体液中乳酸含量的变化。考察了缓冲液添加剂浓度、工作电极电位、缓冲溶液pH和浓度、分离电压和进样时间等实验参数对CE-AD分离检测的影响。在最佳实验条件下,以300μm碳圆盘电极为工作电极,氧化电位为+1100 mV(vs. SCE),在毛细管长90 cm,运行液为4.0×10-6/mL 3,4-二羟基苄胺/40 mmol/L硼砂-硼酸缓冲液(pH 7.8)中,乳酸与实际乳汁、尿液中的干扰物可实现基线分离,其检测限为5.0×10-7g/mL(S/N=3)。该法已成功用于哺乳期女性在中等运动前后乳汁和尿液中乳酸含量的测定。实验结果表明,中等强度运动后,无论是乳汁还是尿液中的乳酸含量都有明显增加(46倍),但乳汁和尿液中的乳酸含量分别可在运动后休息60min和120 min后恢复到正常水平
其他文献
本文综述了遥感在监测城市扩展及其引起的生态环境变化方面的应用和发展情况,并对当前研究中采用的城市动态变化检测方法和城市生态遥感监测指标进行了分析和总结,最后,针对当前
信息质量评价是网络信息质量控制的前提。从网络信息资源的本身特点看,必须有效解决信息质量最优化等实质问题,才能有效提高信息利用率,促进信息服务发展,实现信息价值。从目
<正>踝关节扭伤系骨科临床常见病,占关节韧带扭伤的首位[1],分为内翻型和外翻型,主要是损伤了踝关节外侧副韧带和内侧副韧带。多因行走在高低不平的地面,在运动中身体失去重
小建中汤后世多认为其主治中焦虚寒,但是通过《伤寒论》《金匮要略》相关条文中的提示症状、病机,以及对仲景用药的分析上可以发现中焦虚寒理论并不完美,在有些地方是解释不
<正>急性踝关节扭伤是骨伤科的常见病,在人体诸关节扭伤中发病率最高。它不仅可以导致患处疼痛、肿胀,而且部分患者还可迁延不愈,影响踝关节的运动功能而容易造成习惯性扭伤
博物馆的建设,从建筑外观、内部展示直至其经营战略,要统一于博物馆的总体发展理念。否则,就难以形成合力服务与博物馆存在的目的。他山之石,可以攻玉。我们通过对英国曼彻斯
快速发展的地铁是我国城市解决交通困难的一个重要方式。而地铁的有效的导向设计又是保证地铁快捷的一个重要方面。传统的导向功能主要依靠标识系统来实现。但是,通过调研发
随着西部生态环境问题的日益突出,生态补偿现已成为解决此问题的有效手段之一。基于生态补偿项目社会公平性考虑和项目实施的客观扶贫效果,有关贫困参与者的研究成为近年来国
基于近10多年来国外相关文献资料的梳理与回顾,对建立国家海洋公园的目的与意义,公园在生态环境、渔业及旅游发展等方面对区域产生的影响,公园的选址与规划、经营与管理、相
中药外治扁平疣具有作用直接、副作用少、操作简便、费用低廉、疗效显著等特点。本文结合近年来中药外治扁平疣的相关文献报道,以剂型为纲,对外用中药治疗扁平疣的概况进行综