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毛细管电泳(Capillary Electrophoresis, CE)又称高效毛细管电泳(High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE),具有分离效率高、快速、样品用样量少等特点。CE的分离对象包括无机离子、有机分子、DNA、生物大分子以及对映体等,在分析化学、生物化学、分子化学、药物化学、食品化学、环境化学和临床化学等许多领域,有着广泛的应用前景。绪论中回顾了CE技术的发展历史,介绍了其原理、分离模式、仪器系统和技术特点;重点对毛细管电泳-安培检测(CE-AD)技术进行了详细的介绍;根据本论文的研究内容,侧重论述了CE技术在食品和临床分析中的应用。本论文采用间接CE-AD技术着重探讨了饮料及调味品中四种电活性和两种非电活性防腐剂的同时检测;苯丙酮尿症患者两种尿样标志物,即具有电活性的苯丙酮酸及非电活性苯乙酸的快速分析;以及运动前后乳母体液中乳酸含量的变化,进一步拓展了CE-AD技术在食品分析和临床分析中的应用。本实验采用间接毛细管电泳-安培检测法(CE-AD)同时测定了食品中的多种电活性和非电活性防腐剂。实验以长度为75 cm的熔融石英毛细管(内径25μm,外径360μm)为分离通道,以直径300μm的碳圆盘电极为工作电极,电极电位为+1100 mV (vs. SCE),分离电压为16 kV,进样时间为8 s/16 kV,运行液为含有0.018 mmol/L电活性物质3,4-二羟基苄胺、12 mmol/L表面活性剂SDS、浓度40 mmol/L的硼砂-硼酸缓冲液(pH 8.2)。在上述优化条件下,食品中的四种电活性(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯和对羟基苯甲酸丁酯)和两种非电活性防腐剂(山梨酸钾和乳酸钠)达到了较好的分离,最低检测限(S/N=3)范围为1.06×10-8~2.73×10-g/mL。此法已被成功用于乳饮料、酱油等食品中电活性和非电活性防腐剂的同时检测,结果令人满意。首次采用间接毛细管电泳-安培检测法(CE-AD)同时测定了苯丙酮尿症患者尿液中的两种疾病标志物:具有电活性的苯丙酮酸及非电活性的苯乙酸。考察了运行液添加剂、SDS浓度、工作电极电位等因素对分离和检测的影响。优化实验条件下,以直径300μm碳圆盘电极作为工作电极,电极电位为+950mV(vs. SCE),在运行液为0.018 mmol/L 3,4-二羟基苄胺/20 mmol/LSDS/60 mmol/L硼砂-硼酸缓冲液(pH 7.8)中,两种标志物在15min内可实现基线分离。苯丙酮酸和苯乙酸的检测限分别为0.50和0.92 mg/L(S/N=3)。苯丙酮酸和苯乙酸的浓度与峰高分别在3.0~1.0×103mg/L、2.0~5.0×103mg/L范围内呈良好线性,峰高与迁移时间的相对标准偏差分别为4.4%、3.2%(苯丙酮酸)和2.2%、4.3%(苯乙酸)该方法已成功用于健康婴儿和苯丙酮尿症患儿尿液中两种标志物的分析测定,且完全避免了尿液中主要同存物尿酸对标志物测定的干扰,有望用于苯丙酮尿症患儿的早期无创诊断。本实验采用间接毛细管电泳-安培检测法(CE-AD)测定了哺乳期妇女在运动前后体液中乳酸含量的变化。考察了缓冲液添加剂浓度、工作电极电位、缓冲溶液pH和浓度、分离电压和进样时间等实验参数对CE-AD分离检测的影响。在最佳实验条件下,以300μm碳圆盘电极为工作电极,氧化电位为+1100 mV(vs. SCE),在毛细管长90 cm,运行液为4.0×10-6/mL 3,4-二羟基苄胺/40 mmol/L硼砂-硼酸缓冲液(pH 7.8)中,乳酸与实际乳汁、尿液中的干扰物可实现基线分离,其检测限为5.0×10-7g/mL(S/N=3)。该法已成功用于哺乳期女性在中等运动前后乳汁和尿液中乳酸含量的测定。实验结果表明,中等强度运动后,无论是乳汁还是尿液中的乳酸含量都有明显增加(46倍),但乳汁和尿液中的乳酸含量分别可在运动后休息60min和120 min后恢复到正常水平