中药蒲葵子有效部位化学成分及药材质量控制的研究

被引量 : 10次 | 上传用户:mobydick2000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蒲葵子为棕榈科植物蒲葵Livistona chinensis R.Br.的干燥成熟果实。性味甘、淡、涩,平,具有软坚散结、收敛止血之功效,适用于癥瘕结气,崩漏,跌打损伤,眼底出血等症。现代研究表明,蒲葵子具有抗癌之功效,民间广泛用于治疗各种癌症,如食道癌、鼻咽癌、恶性葡萄胎、白血病、绒毛膜上皮癌、肺癌。但对蒲葵子有效部位药理研究及化学成分研究未见有公开的报道。为了进一步合理开发利用蒲葵子药材,寻找其有效成分,揭示其抗肿瘤作用物质基础,并为药材质量标准的制定提供科学依据,本课题以蒲葵子为研究对象,对其药效物质基础进行了系统研究。化学成分预试验结果表明蒲葵子中可能含有酚类、蒽醌类、香豆素、甾体三萜类、皂苷类、氨基酸类等成分。本课题针对蒲葵子的功效及临床应用,选择适宜的肿瘤细胞株对蒲葵子进行了体外抗肿瘤活性部位初步筛选。首先对蒲葵子进行部位分离,对其石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物,采用MTT法测定了它们各自对人慢性粒细胞白血病细胞株K562、人卵巢癌细胞株SKOV3、人结肠癌细胞株HT-29、人膀胱癌细胞株T24等四种瘤株的生长抑制情况;采用ELISA法检测了它们各自对肿瘤细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响;以活性部位作用于VEGF诱导后的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),采用RT-PCR和Western blot方法分析内皮细胞Flk-1 mRNA和蛋白的表达变化。结果表明,蒲葵子乙酸乙酯提取物可选择性地抑制结肠癌细胞株HT-29和膀胱癌细胞株T24肿瘤细胞的生长,其抑制率可分别达74.66%和86.52%,并可显著降低各肿瘤细胞株分泌VEGF的水平。石油醚提取物对HT-29和T24生长也有一定的抑制作用,其最高抑制率分别为43.80%和38.67%,并可降低各肿瘤细胞分泌VEGF水平,但作用强度均不及乙酸乙酯部位。水和正丁醇提取物未表现抗肿瘤活性。对VEGF诱导内皮细胞表达Flk-1 mRNA和蛋白,乙酸乙酯提取物表现出明显的抑制作用。药理研究结果表明蒲葵子乙酸乙酯提取物有较好的抗肿瘤作用,是抗肿瘤作用的主要活性部位,石油醚提取物也显示一定的活性。对体外抗肿瘤试验筛选出的活性部位,采用柱色谱方法进一步进行系统的化学成分分离和纯化,运用熔点测定、UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR等方法进行结构鉴定。从蒲葵子乙酸乙酯部位分离得到10个化合物,鉴定了其中5个化合物,分别为:(-)表缅茄儿茶精((-)-epiafzelechin,Ⅰ)、β-胡萝卜苷(daucosterol,Ⅱ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅲ)、1,6,8-三羟基-3-甲基蒽醌(emodin,Ⅵ)、5,7,4’三羟基-3’,5’-二甲氧基黄酮(tricin,Ⅶ),其中1,6,8-三羟基-3-甲基蒽醌为首次从该植物中分得。采用GC-MS分析鉴定蒲葵子的石油醚提取部位脂肪酸成分,鉴定出其中11个化合物,占总脂肪酸的94.54%,其中棕榈酸(37.10%)、亚油酸(27.90%)、油酸(20.96%)相对含量较高,不饱和脂肪酸相对含量达到52.28%,并含有ω-3多不饱和脂肪酸:α-亚麻酸、二十碳五烯酸。本课题首次对蒲葵子药材进行了质量控制的研究。建立了小麦黄素对照品的标准;采用高效液相色谱法测定了蒲葵子药材中小麦黄素的含量;并对蒲葵子药材进行了指纹图谱的研究,研究结果表明,该方法稳定、可靠、重现性好,10批药材得到的色谱指纹图谱共标定了31个共有峰,其共有峰的相对保留时间基本一致,不同产地批次蒲葵子药材化学组成相似,其相对比例较稳定。综上所述,本课题首次确定了蒲葵子的乙酸乙酯提取物是其体外抗肿瘤作用的主要活性部位,石油醚提取物也有一定的活性。从乙酸乙酯提取物中分离鉴定了5个化合物,从石油醚提取物中鉴定了11个化合物。同时对蒲葵子药材进行了指纹图谱研究。本课题为最终揭示蒲葵子抗肿瘤作用及其物质基础,建立药材质量的科学评价方法,实现药材可持续开发利用及抗肿瘤中药新药开发提供了科学依据。
其他文献
自然资源是经济增长的物质基础,自然资源价值及其定价方法是研究经济可持续发展的重要内容。就目前自然资源定价理论与定价方法产生的研究成果,本文从经济学意义上进行了理论
目前我国的中学多存在班级容量较大,学生的英语学习基础、认知能力参差不齐的问题。在中国大班教学的大背景下,面对四十几名,甚至近百名学生的大班,教师也只能本着“照顾大多
在电梯运行的过程中,为了保证电梯的稳定性、可靠性以及舒适性,变频器已成为电梯中必不可缺的组成成分。该文分析了施耐德ATV71系列变频器在电梯应用的主要技术性能,最后介绍
随着建筑结构不断向高层结构发展,超高强混凝土得到了日益广泛的应用。超高强混凝土所具有的更高的强度和更好的耐久性正是其表现出越来越显著的优异性能。而非线性有限元仿
对浙江台州电子垃圾拆解区大气、土壤和地下水3种环境介质进行取样分析PBBs的污染水平、组成特征及可能来源,采用USEPA推荐的健康风险评价模型、中国暴露参数,对拆解区人群健
铸钢节点的壁厚大于连接杆件,两者连接时壁厚方向存在几何形状的突变,引起焊缝附近的应力集中,降低其疲劳性能。目前现行规程或标准针对铸钢节点与主体结构连接处焊缝的疲劳
近年来,城管暴力执法、流动摊贩暴力抗法等不和谐现象愈演愈烈,部分城市甚至引发了群体性事件的发生,严重影响了社会和谐。本文通过对城管面临的困境进行了分析,认为城管与摊
视觉信息是交通环境中的主要信息,因而光学导航技术是智能车辆系统(IVS, Intelligent Vehicle System)中不可缺少的组成部分,具有巨大的潜在应用价值。道路识别技术是光学导
<正>全面依法治国是习近平新时代中国特色社会主义思想的重要内容。党的十九大报告指出,全面依法治国是中国特色社会主义的本质要求和重要保障,是国家治理的一场深刻革命。必
目的:观察复方氨基酸口服液对小鼠免疫功能的影响。方法:实验设低、中、高3个剂量组及阴性对照组,分别经口给予复方氨基酸口服液浓缩液3.125、6.250、12.S00ml/kg及蒸馏水,连续30天